蛋白质的生物合成-复旦《医用分子遗传学》课件.ppt

蛋 白 质 的 生 物 合 成Protein Biosynthesis Protein biosynthesis: easy, you can do it! How is protein biosynthesized? Understand the process of protein synthesis, regulation and control with aim to interfere protein synthesis. Stop abnormal protein synthesis (tumor treatment). Biosynthesis of protein drugs. 蛋白质的非生物(人工)合成 人工合成结晶牛胰岛素（中国上海, 1965） 人工合成多肽 中心法则Central Dogma 蛋白质生物合成中的三大发现 第一节 蛋白质合成体系 蛋白质合成的三大物质基础 tRNA 功能:应接器 tRNA 二级结构 tRNA tRNA 碱基修饰 除主要碱基外，核酸中也有一些含量很少的稀有碱基。稀有碱基的结构多种多样，多半是主要碱基的甲基衍生物。tRNA往往含有较多的稀有碱基，有的tRNA含有的稀有碱基达到10％。 tRNA碱基的修饰是他们能够转运氨基酸的前题 校正tRNA (突变修复机制)-无义抑制 校正tRNA－错义抑制 mRNA及遗传密码 遗传密码的特点 (1)连续性和方向性(5’3’): 两个密码子之间无任何核苷酸加以隔开 (commaless)和重叠(nonoverlapping)，如插入/删除碱基，可发生移码突变或框移, “后果很严重”。 遗传密码的特点 How can we take advantage of degeneracy of genetic codon? Insert a restriction enzyme site (site-directed mutagenesis) without changing amino acid sequence. Inactivate restriction enzyme site without changing amino acid sequence to facilitate enzyme digestion. 遗传密码的特点 (3)通用性 (generality):所有的生物使用同一套密码子，仅有少数例外，例如：线粒体起始密码子为AUG、AUU;终止密码为AGA，AGC；色氨酸为UGA等. Expressing human proteins in bacteria to: manufacture protein drugs; characterize human protein structure and function 遗传密码的特点 （4）摆动性(wobbling)：一种氨基酸可有多个密码子 反密码子与mRNA的第三个核苷酸配对时，不严格遵从碱基配对原则，可出现U-G, I-C, I-A,此种配对为不稳定配对，又称摇摆性。一般前两个碱基决定其专一性，第三位碱基可有变异. 遗传密码的摆动性 原核细胞mRNA的结构特点 S-D序列 真核细胞mRNA的结构特点 核糖体 核糖体是由rRNA（ribosomal ribonucleic acid）和多种蛋白质结合而成的一种大的核糖核蛋白颗粒，蛋白质肽键的合成就是在这种核糖体上进行的. 核糖体 ?分类：一类附着于粗面内质网参与分泌蛋白的合成；另一类游离于胞质，参与细胞固有蛋白质的合成. 功能：核糖体相当于装配机，大亚基有转肽酶活性(23S RNA, catalyze peptide bond formation)，促进氨基酸合成多肽. rRNA的结构 rRNA与蛋白质的结合 结合位点：抗核酸内切酶作用区（具有特殊的二级结构） 结合过程：直接结合 在构象变化的基础之上结合 rRNA,与protein分处于核糖体的两端. 多核蛋白体( 原核和真核生物) 一条mRNA上同时结合多个核蛋白体进行蛋白质多肽链合成 第二节 蛋白质的生物合成过程 ★氨基酸的活化与转运 ★多肽链合成的起始 ★肽链的延长 ★肽链合成终止（以原核为例） 氨基酸的活化与转运 氨基酰tRNA的生成 氨基酸的活化 1.参与活化转运的酶????氨基酰-tRNA合成酶:特异性强,催化特定的氨基酸与特异的tRNA结合，每种氨基酸有特异的合成酶催化，此种特异性保证了遗传信息准确翻译 (One synthetase for each amino acid, a single synthetase may recognize mul