Nested-PCR检测种传番茄细菌性溃疡病菌.pdfVIP

每 此 麈 业 学握 2011，20(7)：28—31 ActaAgriculturaeBoreali—occidentalisSinica Nested—PCR检测种传番茄细菌性溃疡病菌 闵现华 ，刘 箐 ，韩跃武 ，文朝慧 ，王军平。，刘姝彤 ，刘雅莉 ，宋 蕤。，施颖波。 (1．兰州大学 基础医学院 医学生物化学与分子生物学研究所 ，兰州 730000； 2．甘肃 出入境检验检疫局 ，国家质检总局外繁种子检疫重点实验室，兰州 730020) 摘 要 ：利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液 、模拟带菌种子及 自然感染种子提取液分别进行 Direct—PCR 和Nested—PCR检测 。结果在纯菌液中，Direct—PCR的检测灵敏度为10 cfu／mL，Nested—PCR为10cfu／mL； 在模拟带菌种子提取液中，Direct—PCR的检测灵敏度为 10cfu／mL，Nested—PCR为 10 cfu／mL；在 自然感染 种子提取液中，稀释 |O 倍后Nested-PCR仍然可以检出。建立的番茄种子Nested—PCR检测技术 ，无需经过 核酸提取步骤 ，可 以在 8h内完成整个检测过程 ，方便快