血管内皮生长因子定量检测试剂盒的研制.pdfVIP

· 180 · 国际牛物制品学杂志2011年 8月第34卷第4期 IntJBiologicals，August2011，Vo1．34，No．4 · 论 著 · 血管内皮生长因子定量检测试剂盒的研制 李树香 王欣怡 刘敬 周亚 徐静 邹检平 摘【要】 目的 研制血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)检测试剂盒(酶标 法)。方法 以一株特异性抗 VEGF单克隆抗体作为捕获抗体，另一株单克隆抗体作为检测抗体，通过 棋盘滴定法确定两抗体的最佳浓度组合。制备冻干VEGFI65参考品，并对样本稀释液、封闭液等实验 条件进行优化。检测 自制试剂盒的特异性并对其进行初步应用。结果 棋盘滴定法确定捕获抗体的 质量浓度为 10 ml，检测抗体 的稀释倍数为 1：20000。冻干 VEGF165的质量浓度为 720～ 880pg／ml，样本间变异系数10％。以5％牛血清白蛋白作为封闭液和样本稀释液最为合适。自制试剂 盒与10种细胞因子均无交叉反应，具有较高的特异性和灵敏度。结论 成功研制出VEGF检测试剂盒。