含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化.pdfVIP

分子植物育种，2009年 ，第 7卷 ，第 2期，第 257—263页 MolecularPlantBreeding，2009，Vo1．7，No．2，257—263 研究报告 ResearchReport 含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化 关宁 王涌鑫 李聪 苗丽宏 张博 z l中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室，北京，100193；2新疆农业大学草地资源与生态 自治区重点实验室，乌鲁木齐， 830052 通讯作者，licong0520@sina．com 摘 要 在本研究中，用限制性 内切酶 ⅣcoI和Bgl1I从中间载体pMD18zeolin和 pMD18zein上切下zeolin 基因(约 1600bp)~H ein基因(约 720bp)，将其定向连接在经相 同酶切的质粒载体 pCAMBIA1302上，构 建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein。采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobac— terumtume eus)菌株LBA4404，利用该菌株转化百脉根(LotuscorniculatusL．)。经过共培养、筛选分化、再 生，得到抗性植株 。对抗性植株进行了PCR、RT—PCR检测表 明，~．zein和 zeolin基因已经整合到百脉