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药物对离体平滑肌受体的作用(设计性) 【实验目的】 利用兔空肠和回肠，观察乙酰胆碱，阿托品及氯化钡对离体兔肠平滑肌的作用。 【实验原理】 离体兔肠平滑肌在适当的条件下可以保持较长时间的自动节律性收缩。根据受体在肠道平滑肌中分布的特点，可观察药物的作用，并可借助工具药分析其作用原理。 由于肠肌上分布有M受体，当向营养液加入Ach（N 、M）受体激动药、阿品托（M受体阻断药）等药物时，可与相应的受体结合，激动或阻断M受体，引起肠肌收缩或松弛。氯化钡是一种非受体作用的有毒化合物，对肠肌有直接的兴奋收缩作用，常用于药理实验中。 【仪器设备】（动物与药品试剂） 1、动物：家兔 2.5 kg左右 2、药品与试剂：A、B、C、D无色透明液体（0.001%氯化乙酰胆碱溶液；0.1%硫酸阿品托溶液；1%氯化钡溶液；台氏液） 3、仪器设备：BL-420E生物机能实验系统，张力换能器，HW-300型恒温平滑肌槽。 【实验步骤】 仪器连接 1、打开HW－300型恒温平滑肌，恒温37-38摄氏度。 2、启动电脑，确认USB接口已经连通，打开BL－420E生物机能实验系统软件，在 “输入信号”下拉菜单中选择“1通道”的“张力”，在“1通道”连接张力换能器。 制备标本 取家兔1只，击头致死，剖腹，取出空肠或回肠，放入台氏液的器皿中，用吸管吸取台氏液将肠内空物冲净，剥离肠系膜。将肠管剪成2 cm的肠段备用。肠管两端对角穿线，将其安放在有台氏液的平滑肌槽中，上端连接张力换能器，下端系于L型钩上，通入空气供氧。恒温37 ℃，调节静息张力为1.5-2.0 g。平衡20 min，其间每10 min换液1次。平衡后浴皿定容至14 ml，描记正常收缩曲线。如果描记曲线有收缩则肠管有活性。 药物对离体兔肠平滑肌的作用 平衡后浴皿定容至14-16 ml，描记正常收缩曲线。加入受试药，观察量效曲线关系的变化。 洗脱。 【实验结果】 【试验结论】 【试验讨论】 【注意事项】 1、实验用动物在实验前24 h禁食，不禁水，以便保持肠道无粪便。 2、每加入药液，至作用明显后，用台氏液连续冲洗3次，等到曲线恢复到用药前的水平，随之描记一段基线，再加入下一个药液，如果肠管反应已失灵，可更换一段肠管。 3、向管内加药时，不要触碰连接线，也不要把药滴到管壁上。 4、肠管与换能器连接线不宜太紧，亦不能与浴管壁接触。 5、试验中主要的观察指标是张力，而不是频率。主要记录平均张力或最大张力。 After mounted, the rings were allowed to equilibrate at 37 °C for 60 min at optimal resting tension (1 g) and meanwhile rinsed with KH solution every 15 min. After establishing a steady basal tone, 1 μM carbachol (about 85% of the maximum) was added to the baths. Once the contraction reached a plateau, the alkaloids (10 μM), demethyl sulfoxide (DMSO, vehicle control, 1‰) or atropine (positive control, 1 μM) were added, respectively.