血细胞计数培训课件(最终).ppt

试剂质量检验部——王贺 血细胞的生成及分化 血液涂片的制备 推片技巧 良好血涂片的要求 血膜至少长25mm，至玻片两侧边缘的距离至少为5mm。 血膜边缘要比玻片边缘窄，且边缘光滑，适用于油镜检查。 血细胞从厚区到薄区逐步均匀分布，末端呈方形或羽毛状。 血膜末端无粒状、划线或裂隙。所有这些情况会使白细胞集中在这些区域内。 在镜检区域内，白细胞形态应无人为异常改变。通常，随着保存时间的延长，抗凝血会造成白细胞形态的改变，如胞浆内形成空泡，核分解破裂等。应将抗凝血液保存时间的影响减小到最低限度。除部分淋巴细胞增生性疾病外，镜检区域内破损白细胞量应<2％。 无人为污染。 瑞氏染色-姬姆萨（ Wright’s-Giemsa’s）混合染色 瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。 姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。 故采用以瑞氏染液为主，姬姆萨染液为辅的混合染色。 染色步骤 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖； 稍等片刻再加姬姆萨染液2-3滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定)； 稍等1-2分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液形成表面张力而终止染色液加入； 染色30-40分钟； 分色：用自来水缓缓冲洗至少3分钟以上,待干，勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。 血涂片检查的方法和程序 将血液充分混匀，尽早推成血片并染色。 先用低倍或高倍镜观察。了解血片染色和细胞分布情况、有无血小板或红细胞聚集（成串、成堆），尾部有无大型、成堆异常细胞等；继续用油镜在涂片厚薄适中处浏览血片，仔细观察红细胞、白细胞及血小板的形态，并估计其数量。如果观察结果与仪器报告相符，不需进行任何补充试验，即可按仪器测定的结果发出报告。 如为贫血或其他血液病患者，其红细胞数量及相关的指标（如MCV、MCH、MCHC）红细胞体积分布宽度（RDW）、直方图或散点图出现异常，则着重观察红细胞的大小、形态、内涵物、着色性、大小一致性以及有无有核红细胞等。如有异常，应加以描述并报告。 正常情况下，在血片厚薄适中区域（每个红细胞彼此相互接触但双不重叠），每个油镜视野，约有血小板8～15个；或每10～30 个红细胞见到一个血小板。 血细胞形态检查的临床意义 正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。 观察血细胞形态、数量及其比例的变化是诊断造血系统疾病最基本的检查方法。 造血系统疾病，引起血细胞形态学的量和质的改变。 血细胞形态学检查为临床提供诊断依据。 血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分。外周血细胞改变往往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。 外周血细胞的主要成分 白细胞 红细胞 血小板 白细胞计数 WBC计数的正常范围：4.0~10.0×109/L; WBC正常限度以下: 轻度减少(<4.0～3.0×109/L), 中度减少(<3.0～2.0×109/L), 极度减少(<2.0×109/L); WBC正常高限度以上: 轻度增多(>10.0～20.0×109/L), 中度增多(>20.0～40.0×109/L), 明显增多(>40.0～80.0×109/L) 极度增多(>80.0×109/L)。 白细胞分类 正常成人白细胞分类范围： 　　　　　　　　 　　　　　 　　　　　　　　　　　　 　　　 外周血中常见的五种白细胞 分叶核 细胞大小为10～15μm。 细胞核与细胞浆比率为1:3。 细胞呈圆形或卵圆形。 细胞核分叶，叶间有丝状连接，分为2～5叶。 核染色质聚集。 无核仁。 细胞浆染成淡粉红色，含大量特异性颗粒。 杆状核 细胞大小为10～18μm。 细胞核与细胞浆比率为1:1.5～1:2。 细胞呈圆形或卵圆形。 细胞核呈S形，C形,U形或分叶形，可见峡状染色质。 核染色质粗颗粒状聚集。 无核仁。 细胞浆丰富，染成粉红色；含大量特异性颗粒，罕见嗜天青颗粒。 分叶核与杆状核细胞的区分 中性粒细胞的毒性变化 所谓中性粒细胞的“毒性”变化，它是指白细胞在细菌、病毒等抗原，在毒素的刺激下，造成的一种形态学变化。如胞浆内出现“毒性颗粒”、杜尔（Dohle）小体、空泡、脱颗粒以及胞质肿胀等现象；胞核出现固缩（pyknotic）肿胀等。检查这种变化，首先要制备厚薄适中，染色良好的血片。因为血片太厚，细胞缩小，胞质的内容物不易看清；染色太深，会将正常中性粒细胞浆内的颗粒也染得很深而