miR-155种子序列的反义寡核苷酸对抗多发性骨髓瘤的作用.pdfVIP

· 1368 · 中国病理生理杂志 ChineseJoumalofPathophysiology 2014，30(8)：1368．1373 [文章编号] 1000—4718(2014)08．1368．06 miR·155种子序列的反义寡核苷酸 对抗多发性骨髓瘤的作用球 丰茂晓 ， 朱容萱 ， 骆小闯 ， 古春明 ， 曾 雪 ， 费 嘉 (暨南大学医学院 生物化学与分子生物学系，临床医学系，广东 广州510632) [摘 要] 目的：探讨针对miR一155种子序列的微小反义核酸(tinyantimiR．155，t-antimiR．155)对多发性骨 髓瘤细胞的抑制效应。方法：化学合成t-antimiR一155，通过脂质体转染多发性骨髓瘤RPMI．8266细胞株；实验分为 t-antimiR-155组 、随机对照组 (SCR)和空白对照组 ；通过MTF法检测细胞增殖抑制率；使用细胞集落形成实验观察 集落形成情况；流式细胞术(AnnexinV／PI双染法)检测细胞凋亡率。结果：(1)MrITr筛选 t-antimiR．155显著抑制 RPMI-8266细胞生长的浓度，t-natimiR一155的最佳浓度是0．4~mol／L，最佳作用时问是转染后48h。(2)细胞集落 形成实验显示，相比于SCR组，t-natimiR一155组细胞形成集落的能力减弱 ，集落形成率显著降低。(3)相 比于 SCR 组，t-antimiR一155组的细胞凋亡率明显增加，差异显著。结论：t-antimiR．155可能通过干扰miR．155表达有效抑制 多发性骨髓瘤细胞的进展；miR．155可能作为多发性骨髓瘤基因治疗的潜在靶点。 [关键词] miR一155；多发性骨髓瘤；t-antimiR-155；RPMI一8266细胞；寡核苷酸，反义 [中图分类号] R329．21 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2014．08．005 AntisenseoligonucleotidestargetingseedsequenceofmiR-155anditsap— plicationsinmultiplemyeloma FENG Mao-xiao ，ZHU Rong．xuan ，LUO Xiao．chuang ，GU Chun—ming ，ZENG Xue， FEIJia (DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，DepartmentofCliicalMedicine，SchoolofMedicine， 加nUniversi— ty，Guangzhou510632，China．E—mail：efejiia@163．corn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheroleoftinyantisensenucleicacidagainstmiR一155(tinyantimiR-155， t—antimiR·155)inmultiplemyelomacells．METHODS：AccordingtotheseedsequenceofmiR-155。t—antimiR·155was designedandsynthesized．t—natimiR一155wastransfeetedbyLipofectamine 2000intoRPMI-8266ceils．Thecellsweredi． videdintota·ntimiR-155group，scrambledcontrol(SCR)groupnadblankcontrolgroup．Thergowth-inhibitorypotencies weremeasuredbyMTrassay．Th eabilityofcellcolonyformationwasdetectedbycellcolonyformationassay．Thecell印一 optosiswasassessedbyflow eytometry withannexin、 PIdoublestaining．RESULTS：T