苏云金芽孢杆菌普鲁兰酶编码基因amyX的鉴定与重组酶性质研究.pdfVIP

维普资讯 安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2008，36(17)：7155—7156，7161 责任编辑 李 玮 责任校对 况玲玲 苏云金芽孢杆菌普鲁兰酶编码基因amyX的鉴定与重组酶性质研究 林杰，沈微 ，饶志明，方慧英，诸葛健 (江南大学工业生物技术教育部重点实验室生物工程学院，江苏无锡214122) 摘要 f目的1研究苏云金芽孢杆茵 konkukian亚种amyX基 因在大肠杆茵 中的表达及表达产物的性质。f方法1以苏云金芽孢杆茵 (Bacillusthuringiensis)染色体 DNA为模板 ，PCR扩增得到amyX普鲁兰酶结构基 因，再与大肠杆茵表达载体pET28a连接，构建能表 达普鲁兰酶的重组大肠杆菌。重组菌经IPTG诱导，表达有活性的普鲁兰酶，初步分析重组普鲁兰酶的酶学性质。f结果1结果表明，苏 云金芽孢杆茵基因组序列有两条基因(pulA和amyX)可能编码普鲁兰酶。温度为 50℃，pH为6．0时，重组酶不能水解淀粉，属于I型 普鲁兰酶。f结论1amyX基因能在大肠杆茵细胞内成功表达，表达产物具有典