细胞工程课件六动物干细胞.ppt

* 美日两个研究小组2007年11月21日分别宣布成功地将人皮肤细胞改造成几乎可以和胚胎干细胞相篦美的干细胞，其基本原理都是利用基因重新编程技术，向皮肤细胞中植入一组4个基因，通过基因重新编程，使皮肤细胞具备与胚胎干细胞十分相似的功能，可分化为人体多种组织细胞。 2007年诺贝尔生理医学奖授予英国人马丁·埃文斯、美国人马里奥·卡佩基和奥利弗·史密斯 ，三位科学家“在涉及胚胎干细胞和哺乳动物ＤＮＡ重组方面有着一系列突破性发现”，为“基因靶向”技术的发展奠定了基础。 2012年诺贝尔生理学或医学奖授予英国科学家约翰?格登（John B. Gurdon）和日本科学家山中伸弥（Shinya Yamanaka），以表彰他们在细胞研究领域作出的突出贡献。 格登早在1962年通过一项经典实验，发现已分化的特定成熟细胞要想变回“从前”，是可逆的。 40多年后，山中伸弥发现完整的特定成熟细胞如何在老鼠体内重组成为非成熟干细胞，通过引入少数基因，他能将特定成熟细胞重新编程为诱导多功能干细胞，这种细胞与其他多功能干细胞的特点一样，都能发育成各种其他器官的细胞，因此具有重大的医学研究价值。 * 胚胎干细胞直接植入子宫，不能发育成个体，因为没有着床必需的滋养层细胞。 胚胎干细胞必须重新注入囊胚的内细胞群，内细胞群大量细胞中混有少量携带外源基因的胚胎干细胞，这样的囊胚植入代孕母体的子宫，产生的后代将是嵌合型的个体，个体的一部分细胞带有外源基因，另一部分细胞不带有外源基因。性系细胞也如此。实验动物通过筛选、交配，就可以获得外源基因可以稳定遗传的纯合个体。 4.干细胞研究意义 干细胞研究几乎涉及生命科学及生物医药的所有领域，除了对细胞治疗、组织器官移植、基因治疗具有重要作用外，还将对新基因的发现、基因功能分析、新药开发、药效与药物毒性评估等领域产生重要影响。 其意义主要表现在以下几个方面： (1)为临床多种疑难病的治疗带来希望； (2)为组织工程提供取之不尽、用之不竭的原料； (3)为探讨哺乳动物早期胚胎发育的机制提供模型； (4)为研究与发育相关的基因的功能提供良好的模型； (5)提供更为便捷的转基因动物方案； (6)在发现新基因、基因功能分析方面有重要意义； (7)对新药开发、药效与药物毒性评估等领域产生重要的影响。 5. 干细胞的应用前景 随着干细胞技术和理论的发展，产生了一门新的学科分支－再生医学。它是一门使用多种修复技术手段使人体的组织器官功能得以改善或恢复的新兴学科，其中基因治疗和细胞治疗是重要的组成部分。 若能成功诱导和调控体外培养的ES细胞进行定向分化，将对研究新基因的表达特性和生理功能发挥重要作用，同时使得用移植干细胞来治疗各种疑难疾病，甚至在实验室内生产各种组织器官成为可能。 5.1 干细胞与临床治疗 ES细胞具有自我更新能力，且能在体外增殖和分化过程中保持基因组DNA的稳定性，是目前理想的基因治疗载体细胞。 很多疾病，特别是采用其他方法无法治疗的疾病，可以通过干细胞而治愈。这些严重的疾病包括帕金森氏病、糖尿病、慢性心脏病、晚期肾病、肝病、神经系统疾病、感染性疾病研究、风湿性关节炎，基因治疗、癌症等。ES细胞是细胞治疗的良好靶细胞。 将目的基因导入ES细胞，使基因的整合数目、位点、表达程度和插入基因的稳定性及筛选工作都在细胞水平进行，保证了基因治疗的安全性与有效性。 例如: 如果发现早期胚胎有某种基因缺陷而会患基因缺陷病－囊性纤维化，可以收集部分或全部ES细胞，通过基因工程技术用正常的基因替代干细胞中的缺陷基因，再将修复后的胚胎干细胞嵌入胚胎中，经过妊娠将会产生一个健康的后代。 向小鼠受损心脏移植胚胎心肌细胞（embryonic cardiac-muscle cells），成功地使其恢复了功能，这意味着干细胞治疗技术可以治愈人类受损心脏。 通过同源重组，改变ES细胞的MHC基因结构，或用受体的MHC基因置换ES细胞的MHC分子，建立适合不同个体移植的通用ES细胞系，从而消除ES细胞免疫源性。 5.2 建立哺乳类动物发育的体外模型 （1）ES/EG细胞系为哺乳类动物胚胎早期发育和细胞分化的研究提供了充分的材料来源。ES细胞悬浮生长时可得到类胚体，成为早期胚胎发育分化的体外模型。 （2）在特定的体外培养条件和诱导剂的共同作用下，ES细胞在体外可被诱导分化为属于三个胚层谱系的各种高度分化的体细胞，是研究某些前体细胞起源和细胞谱系演变的理想实验体系。 （3）通过对培育出的大量胚胎发育过程中不同时期细胞基因表达的研究，有望认识胚胎早期发育或畸胎发生的机制。 （4）可以利用同源重组或基因打靶技术使ES细胞的某些基因发生突变，对在胚胎发育中起作用的基因进行分析，这样不仅可以了解早期胚胎