产单核细胞李斯菌减毒突变株的构建及其免疫生物学特性的研究.pdf

扬州大学博士学位论丈 产单核细胞李斯特菌减毒突变株的构建 及其免疫生物学特性的研究 研究生殷月兰 导师焦新安 中文摘要 产单核细胞李斯特菌(￡括地，蛔monocytogenes，LM)是人兽共患李斯特菌 病的病原，主要通过食用被LM污染的食品感染，能引发人的脑膜炎、发热性 败血性胃肠炎、孕妇流产等，感染后发病死亡率约为25％。欧美国家曾多次暴 发流行，LM对食品的污染与危害，已引起世界各国的普遍关注和高度重视， 其中研制预防李斯特菌病的减毒活疫苗是重要的课题之一。另一方面，鉴于LM 是胞内寄生菌，减毒LM是非常有前景的疫苗载体之一。为此，本研究通过同 源重组的方式对血清型为l／2a的野生型菌株基因组中相邻的两毒力基因actA 和plcB进行缺失，获得减毒重组菌株，并以减毒株开展了以原核和真核表达的 不同方式运送模式蛋白GFP的研究。为了对减毒株的免疫保护力进行评价，哕 及从不同水平上证实基因的缺失，对毒力基因^咖和actA在大肠杆菌中进行丁· 原核表达并对ActA蛋白进行了单抗的研制。