围产期奶牛肝微体甘油三酯转运蛋白基因表达的调控研究.pdf

围产期奶牛肝微粒体甘油三酯转运蛋白 基因表达的调控研究 摘要：本研究通过奶牛饲养实验、体外新生牛肝细胞培养和定量RT-PCR方法， 运用分子生物学技术，检测不同能量水平(80％、100％和120％能量组)对围产期奶 牛肝MTPmRNA的丰度，观测体外牛肝细胞培养液中添加不同浓度的神经内分泌因 子(瘦蛋白、胰岛素和胰高血糖素)和代谢产物(葡萄糖、非酯化脂肪酸和B一羟丁 酸)对肝细胞MTPmRNA表达的影响等工作，从细胞和分子水平研究能量代谢状态、 神经内分泌因子和代谢产物对围产期奶牛肝VLDL组装与分泌的调节蛋白MTP基因 表达的调控机制。 体内实验结果显示，不同能量组奶牛肝MTPmRNA丰度均呈现先升高后降低的 奶牛肝MTPmRNA的表达。各试验组奶牛显著上调分娩前后和泌乳初期的肝 了奶牛肝MTPmRNA的表达。干乳期给予高能量饲料可上调围产期奶牛肝 转运。 体外肝细胞培养添加神经内分泌因子结果显示，低胰岛素浓度显著地抑制了肝细 高血糖素显著地抑制了肝细胞MTPmRNA表达水平，该抑制作用呈现剂量依赖性的 表明胰岛素、胰高血糖素、瘦蛋白可能是影响MTP基因表达的内分泌因子。 体外肝细胞培养添加代谢产物结果显示，非酯化脂肪酸促进肝细胞的MTPmRNA 表达水平，且低浓度(O．5mmol／L)的非酯化脂肪酸表现出强的丰度上调；B一羟丁酸 对MTPmRNA表达表现出先促进再抑制的双重作用；葡萄糖显著地促进了肝细胞 化脂肪酸、13一羟丁酸、葡萄糖也可能是影响MTP基因表达的代谢因子。 体外肝细胞培养结果揭示了神经内分泌因子和代谢产物可影响新生牛肝 关键词：微粒体甘油三酯转运蛋白基因表达；神经内分泌因子；代谢产物：定量 RT-PCR；围产期奶牛 II On of Microsomal StudyRegulationHepatic TransferProteinGene on Expression Cows Dairy Chen Medicine) Shijun(ClinicalVeterinary Directed byDengJunliang WangZhe Abstract：Inthis conductedthree COWSintaked study,we items：mulfiparousdairy different bovine culturedin standard，new-born vitro，and energy hepatocytes quantitive RT-PCR detecttheabundanceMTPmRNAofthe applied，to dairy ofhepatic periparturient COWSwhichwerefedwithdifferentstandard detectthe of energy feeds，to abundance cellMTPmRNAin