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氧化应激在脱氧雪腐镰刀菌烯醇致HepG2细胞 DNA损伤中的作用 硕士生姓名：张晓欧 指导教师：仲来福 教授 专业名称：劳动卫生与环境卫生学 摘 要 目的；脱氧雪腐镰刀菌烯醇是一种单端孢霉烯毒素，广泛的存在于 发霉的小麦，大麦，玉米等粮谷类农作物及其食品中。污染率较高，目 前认为DON是存在于赤霉病小麦中的主要天然毒素之一，是世界范围内 粮食饲料的污染物之一，对人畜构成很大危害，已被联合国粮农组织和 世界卫生组织确定为最危险的自然发生食品污染物。 for on 国际癌症研究机构(InternationalResearchCancer， Agency IARC)将DON对人类的致癌性划归为列第三类，即现有证据尚不能就 其对人类致癌性进行分类。体外试验显示，DON可引起染色体畸变。DON 能引起质脂过氧化产物丙二醛(MDA)的产生。肝脏是DON代谢的主 要部位。有研究显示DON具有遗传毒性，这有可能与自由基和活性氧 (ROS)的产生有关。因此，我们试探讨DON引起的DNA损伤是否与 氧化应激有关。本研究选用一种代谢完全的人类来源的肝肿瘤细胞株 HepG2细胞，它不仅保持了人正常肝实质细胞的许多功能，还保留了一 系列生物转化过程中的I相和II相酶，是检测外来化合物遗传毒性的理 想细胞系。 本研究选用HepG2细胞作为实验系统，探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇的 DNA损伤作用及可能的机制，旨在为评估脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人类健 康的危害性提供实验室依据。 方法：以HepG2细胞作为试验系统。通过单细胞凝胶电泳(SCGE) 试验检测细胞DNA损伤，在彗星试验的基础上用抗氧化剂羟基酪醇(HT) 做DNA保护。为探讨其可能的氧化性机制，以2’，7’一二氢二氯荧光素 (DCFH)法测定细胞内活性氧(ROS)水平，用硫代巴比妥酸反映物 (TBARS)测定法检测细胞内脂质过氧化水平，以免疫组化方法检测细 胞内8．羟基脱氧鸟苷(8．OHdG)的表达水平。 结果：3．75 pM～30pM的DON作用于HepG2细胞后，引起细胞的 DNA链断裂，DNA的迁移距离明显增加，且呈剂量依赖关系。用25、 50、100 减少，DON’引起的DNA损伤几乎完全被防止，且随着HT剂量增加， 5 DNA损伤预氧化应激有关。lttM-60 h可引起细胞内ROS表达水平的显著增加。3．755 ttM～1ttM的DON作 用与细胞24h后，TBARS增多。7．5 gM～60ttM的DON作用与细胞3h 后，细胞内8．OHdG表达水平增强。均呈剂量依赖关系。 结论：脱氧雪腐镰刀菌烯醇可致HepG2细胞DNA损伤，其作用机 制可能与氧化应激有关，通过ROS的增高，8．OHdG的形成，从而导致 细胞的氧化性损伤。 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇 单细胞凝胶电泳试验HepG2细胞 DNA损伤氧化应激 2 stressin roleofoxidative The DNA in cells damageHepG2 Master candidate：Xiaoou degree Zhang Laifu Zhong