血清总胆红素与结合胆红素测定.pptVIP

燕 德 起 血清总胆红素和结合胆红素测定 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 【原理】 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，产生偶氮胆红素；非结合胆红素须有加速剂咖啡因-苯甲酸钠-醋酸钠作用，其分子内氢键破坏后才能与重氮试剂反应，也产生偶氮胆红素。本法重氮反应pH6.5，最后加入碱性酒石酸钠使紫色偶氮胆红素(吸收峰530nm)转变成蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，使检测灵敏度提高。 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 【试剂】 1．咖啡因-苯甲酸钠试剂 称取无水醋酸钠41.0g，苯甲酸钠38.0g，乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)0.5g，溶于约500ml去离子水中，再加入咖啡因25.0g，搅拌使溶解(加入咖啡因后不能加热溶解)，用去离子水补足至1L,混匀。滤纸过滤，置棕色瓶，室温保存。 2．碱性酒石酸钠溶液 称取氢氧化钠75.0g，酒石酸钠(Na2C4H4O6?2H2O)263.0g，用去离子水溶解并补足至1L，混匀。置塑料瓶中，室温保存。 3．72.5mmol/L亚硝酸钠溶液 称取亚硝酸钠5.0g，用去离子水溶解并定容至100ml，混匀，置棕色瓶，冰箱保存，稳定期不少于3个月。作10倍稀释成72.5mmol/L，冰箱保存，稳定期不少