SOP纸片法药敏实验技术方案.docVIP

纸片法药敏试验 1）目的 本操作规程依据WS/T 125-1999，规定了临床抗菌药物敏感试验标准（纸片法 内容做必要的细化和补充，规范检测方法。 适用范围 本细则适用于。 职责 检测人员：负责按照本细则对被检样品进行检测。 复核人员：负责对检测操作是否符合规范以及检测结果是否准确进行复核。 方法原理 纸片法药敏试验由快速生长的致病菌标定，适合肠杆菌科、葡萄球菌、肠球菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌。经适当改动可用来测定嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌。对于使用培养基不同、孵育环境不同或生长率不同的菌类，不能用纸片法做药敏试验。 仪器设备 。 试剂与材料 。 环境条件 操作环境温度、湿度、电源。 检测步骤 .1 制备接种菌液 .1.1 增菌法 选琼脂平板上形态相同的菌落至少4~5个，用接种环挑其顶部，移至4~5ml肉汤或大豆酪蛋白消化液中。放置35培养至菌液浓度达到或超过比浊管浓度（一般需2~6h），浓度约1~2×108cfu/ml。用生理盐水或肉汤校正菌液浓度至与麦氏单位标准比浊管相同。可用光电比浊。 .1.2 直接菌悬液法 可直接用过夜培养的菌落（必须用无选择性培养基，如血平板）在盐水或肉汤中制备接种菌液。菌液浓度调至0.5麦氏单位标准比浊管。此法亦适用于在肉汤培养基中生长不好的细菌如嗜血杆菌、淋病奈瑟菌及葡萄球菌的甲氧西林或苯唑西林的药敏试验。 .2