《第15章核酸的物理化学性质和研究方法》.pptVIP

一、核酸的水解 （一）碱水解 （二）酸水解 （三）酶水解 2、测定核酸和核苷酸的紫外吸收的意义 （1）测定核酸在细胞和组织中的分布 （2）测定核酸或嘌呤、嘧啶及其衍生物或核酸在纯溶液中的浓度。 （3）测定核酸或嘌呤、嘧啶及其衍生物在层析图谱上的位置。 3、DNA的变性后的理化特性 黏度降低:天然的线型DNA,长径比大,可达1:107,水溶液黏度很大,变性后,螺旋变成线团,黏度显著降低. 紫外吸收值增加, 沉降系数(S)增加 五、 核酸的核苷酸序列测定 （一）酶法 （二）化学法 其中酶法经不断改进，使用较广泛。 六、DNA微阵技术 DNA微阵或叫基因芯片（gene chip)是以硅、玻璃、微孔滤膜为材料作为承载基片，通过为加工技术，在其上固定密集的不同序列的DNA，在1cm2的芯片上排列的DNA片段常有数十、数百甚至数十万个。一次杂交可获得大量的杂交信息。微阵技术因具有检测快速、灵敏、获得的信息量大，近几年发展迅速。 （一）DNA芯片的类型 固定在芯片上的DNA可分为三类： （1）从不同生物中分离的基因、基因片段或其克隆产物。将这些基因按阵列固定在芯片上。 （2）cDNA或是从cDNA文库中分离到的部分表达序列，即表达序列标签（EST)，可用以检测基因的表达水平或基因组的表达谱。 （3）合成寡核苷酸，现可根据需要设计出寡核苷酸的序列，通过DNA合成仪自动化合成。用于芯片的寡核苷酸