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AKP的纯化以及Km的测定 ——结果分析以及实验介绍 组员：柳毅浩 张佳薇 周坤 谢金容 Contents 结果展示与思考 1 离子交换层析 2 A510值 活性单位 蛋白质浓度 AKP比活性 A 0.035 1.98 0.437 4.53 B 0.023 1.3 0.294 4.42 C -0.002 — 0.004 — D 0.005 0.11 0.032 3.44 标准管 0.062 1 结果展示与思考 注：C组数据出现负值不能使用，作图时弃掉此点 1 结果展示与思考 因为AKP在30%的乙醇 或33%的丙酮中是溶解 度最大的，浓度增大或 减小使其溶解减少 原因分析 第一次加入95%乙醇 时误加多 第一次加入丙酮后 实际体积和计算体积 相差较大 实验操作错误 1 结果展示与思考 原因分析 移液器和滴管滴加后体积不同，但两者均会 造成有机溶剂浓度偏高 措施：根据第一次加入后总体积修正第二次 加入体积。 水的错误加和 1 结果展示与思考 原因分析 加入正丁醇充分搅拌后静止不分层 过滤速度过慢 加入预冷有机溶剂时速度过快 分光前振荡不充分或者气温较低 反应缓慢 其他 1 结果展示与思考 2.离子交换层析 影响因素 PH大小 交换剂和待分离样品离子化程度发生