化学药品灭菌无菌工艺验证指导原则培训(2015.04.08)讲述.ppt

3.制剂无菌生产工艺 3.2.1.3. 试验结果的评价 -培养基模拟灌装试验需要对所有灌装样品进行培养和无菌检查。培养基模拟灌装试验的目标是零污染，应当符合以下要求： 灌装数量 允许的污染数量 少于5000支时 不得检出污染品 5000至10000支时 有1支污染，需调查，可考虑重复试验； 有2支污染，需调查后，进行再验证 超过10000支时 有1支污染，需调查； 有2支污染，需调查后，进行再验证 -一旦发现污染，需要进行偏差调查，包括污染菌的鉴别、污染情况的评估、是否可以重复进行试验等等。 3.2.1. 除菌过滤系统的验证 3.制剂无菌生产工艺 -除菌过滤系统的验证一般包括微生物截留研究、相容性研究（包括可提取物和浸出物研究、化学兼容性研究和吸附研究）。 3.2.2.1. 微生物截留研究 -验证目的：除菌过滤器微生物截留试验是通过模拟实际过滤工艺，过滤含有一定量生物指示菌的产品溶液或者产品替代溶液，确认除菌过滤器的微生物截留能力。 -过滤器的微生物截留验证的设计： -a、挑战用微生物的选择 通常采用缺陷性假单胞菌作为挑战性试验用菌；如果使用其他细菌，应保证该细菌足够细小至足以挑战除菌级别过滤器的截留性能，并能代表产品中发现的最小微生物。应尽可能的进行微生物负荷的鉴别和量化研究，掌握所分离的微生物的形态学特征，为挑战性微生物的选择提供依据。 a、挑战用微生物的选择 -挑战性微生物的大小可以通过其可穿过0.45微米级别的滤膜来确证。通常情况下，标准培养条件下生长的缺陷性假单胞菌，在高挑战浓度（如≥107/cm2）时，能少量穿过0.45微米级别的滤膜。 3.2.2.1. 微生物截留研究 -b、微生物截留试验条件 在试验室模拟生产工艺条件，将定量缺陷性假单胞菌加入到挑战溶液中进行过滤，缺陷性假单胞菌的加入量应当能够在预定的时间内提供稳定的挑战浓度，并应尽可能确认缺陷性假单胞菌的单分散性状态。挑战溶液应尽可能使用实际产品。 微生物截留试验过程中的压差应达到或超过实际生产过程的最大压差和/或单位面积的最大流速（在过滤器制造商的设计规范内）。 微生物截留验证研究应包括多个批次的滤膜（通常三个批次），其中至少应有一个批次，其预研究时或物理完整性测试时的数值符合但是接近（例如，10％之内）过滤器生产商提供的合格规范限值。 3.制剂无菌生产工艺 3.制剂无菌生产工艺 3.2.2.1. 微生物截留研究 c、微生物截留验证研究中使用的过滤膜的物理完整性检测数值应包括在试验报告中。 物理完整性检测应使用具有标准值的物料进行，如水、70%异丙醇、或其他溶液。微生物挑战试验前后均应进行完整性测试。 物理完整性检测应使用具有标准值的物料进行，如水、70%异丙醇、或其他溶液。微生物挑战试验前后均应进行完整性测试。 如果微生物截留验证研究中，在过滤器的下游检测到测试用微生物，则应进行调查。如果调查确认测试用微生物能穿透完整性检测达标的过滤器，那么就应重新考虑此种过滤器在这些工作条件下的适用性。 除菌过滤时不推荐重复使用过滤器。如果需要重复使用除菌级过滤器，需要说明理由，并对重复使用的相关参数（如最多处理批次、过滤量等）进行严格的验证后确定相应的范围。 3.制剂无菌生产工艺 3.2.2.2. 相容性研究 a、可提取物和浸出物研究 可提取物指在人为或挑战性条件（如溶剂、温度或时间）下，从过滤器中脱离的任何化学组分。通过可提取物的研究，可以尽可能多地了解过滤器组件材料中可能被提取出来的物质，并据此建立专属、灵敏、可行的分析方法。浸出物是指在正常储存或使用条件下，从过滤器中进入产品或溶液中的物质。 潜在的可提取物或浸出物的来源包括但不限于：膜组件（如：成形剂、表面活性剂、抗氧化剂、残留溶剂、支架层）和塑料组件（如：封盖、外壳、支架、O型圈）。影响因素包括灭菌方法、过滤液的化学性质、接触时间、温度、过滤量与面积之比等。 考虑到可提取物的来源不同和影响因素较多，建议过滤器使用者在开展研究时尽可能使用实际产品，并使用与实际生产相同类型的过滤器。当产品会干扰分析方法或产品过于昂贵等时可使用替代溶液，替代溶液必须与待过滤产品性质尽可能一致，能代表产品的溶解性作用和化学特性。 3.制剂无菌生产工艺 a、可提取物和浸出物研究 确定了用于可提取物试验的萃取溶液（产品、替代液或几类溶液合并使用）后，在后续试验设计时应模拟实际生产条时的最差条件，具体可考虑温度、时间、pH值和预处理（如：冲洗、灭菌）工序等关键变量。可提取物试验应采用过滤装置处于最差条件时的接触时间和温度，使用灭菌后的过滤器来完成。可以用静态浸泡或循环流动的方法。采用静态浸泡法时，过滤器在给定温度的萃取溶液中浸泡一段既定的时间。而采用循环流动法时，萃取液在既定的时间内循环反复穿越过滤器。将萃取液收集并检测，从而确