实验三单向琼脂扩散实验资料.pptVIP

临床免疫学实验指导 检验医学院 免疫学教研室 吴荣泉 实验二、 单向琼脂扩散试验; 【实验目的与要求】 掌握单向琼脂扩散试验的原理、操作方法、 结果分析及临床应用 ;【操作注意事项】 1. 制备抗体琼脂板 琼脂温度必须严格控制，温度 太低琼脂会凝固，太高则会影响抗体的活性 2. 加样孔内的琼脂应挑干净，切不可损坏孔的边 缘，确保每孔的液面基本一致 3. 加样精确，不能逸出孔外，否则结果不好观察 4. 加样吸取不同每份标本均应更换塑料吸头 5. 检测过程中，标准曲线必须与样品同步操作 6. 孵育时间应控制在37℃，24-48小时，时间太短 或时间太长会影响沉淀线的形成和清晰度。 ; 【标准曲线的制备】由实验教师; 标准曲线与样品测定结果（实物实拍） ; 以沉淀环直径为纵坐标，以抗原标准浓度的对数值（Lg） 为横坐标绘制标准曲线，根据样本测得直径，查出结果。; 【实验方法】 1. 制备1.0%免疫盐水琼脂液 取琼脂粉1.0g ，加入100ml. NS，混匀加热溶解。 加热时用玻棒不断轻轻搅拌，使成透明液体，放56℃， 加入 1 : 2 稀释的羊（兔）抗人血清1.25ml，混匀， 56℃保温备用。 2. 制板： 每2人制作1个凝胶