培训课件-MSI微卫星不稳定性.ppt

MLH1或MSH2检测的敏感性80-91%，特异性90% MSH6或PMS2的敏感性为55-77%，特异性90% BRAF V600E突变与MLH1启动子甲基化有关，可以排除林奇综合征 免疫组化的敏感性83%，特异性90% 符合阿姆斯特丹标准但MMR无突变的患者被命名为家族性结直肠癌X型 JAMA, October 17, 2012—Vol 308, No. 15 敏感性 特异性 诊断产出率 通用肿瘤测试 100% 93.0% 2.2% 选择性策略 95.1% 95.5% 2.1% Bethesda 87.8% 97.5% 2.0% 耶路撒冷建议 85.4% 96.7% 1.9% 林奇综合征易发生多处原发肿瘤，54-61%会发生第二种原发肿瘤，15-23%会发生三种或更多的原发肿瘤。 如果林奇综合征患者在发现第一处大肠癌时未进行结肠次全切除术或全切术，那么其在10年内发生另一处原发性大肠癌的几率大概为25-30％ 筛查建议 对于诊断为林奇综合征(MMR基因突变阳性)患者及亲属,应更早给予更密集的结肠镜检查 对未发生结肠癌的基因突变携带者，应从20岁～25岁起（或在家族中最早确诊结肠癌者诊断年龄前10年）进行结肠镜检查，每1～2年1次，35岁后每年1次，并切除检查中发现的结肠腺瘤，可有效的预防结直肠癌。 通常不推荐预防性结肠切除。 女性基因突变携带者建议30-35岁开始，每1-2年接受一次妇科检查、经阴道超声检查和子宫内膜检查，以预防子宫内膜癌和卵巢癌；如果绝经后或生育后可考虑预防性子宫及双附件切除术，尚未被推荐为标准。 家族中有胃癌史，建议从30-35岁开始，每1-2年进行一次胃镜检查，若无家族史，则尚未推荐胃镜。 * 基本概念 Microsatellites是指分布在人类基因里的简单重复序列，包含单核苷酸，双核苷酸，或高位核苷酸的重复（小于10个），如（A）n或（CA）n。重复次数为10-50次。 Mismatch repair MMR系统是监督和纠正微卫星中产生的错误，具有高度保守性。 MLH1，MSH2，MSH3，MSH6，PMS2是该系统中主要的蛋白，形成异二聚体相互作用。 检测到错配时，MSH2与MSH6或MSH3相结合，MLH1与PMS2，PMS1或MLH3相结合 基因的突变累积到DNA发生错误，导致了MSI。 可发生于各种肿瘤，结直肠癌，胃癌，子宫内膜，卵巢癌，脑胶质瘤，淋巴瘤。 最早发现于结直肠癌，MSI显型持续呈现MMR缺陷的特征。观察到MLH1，MSH2，MSH6和PMS2的突变在结直肠癌变倾向中起到一定作用，如Lynch综合征。 流行病学 MSI存在于15%的CRC，大部分是散发的和由于MLH1启动子的超甲基化导致。其中20%（总体CRC的2-4%）基于Lynch综合征 CRC的2-3%是由于错配修复基因（MLH1，MSH2，MSH6和PMS2）中的一个胚层突变导致 II期CRC MSI 20%，III期 12%，IV期低于4% 美国黑人20-45%，埃及人37%（小样本回顾性） MSI肿瘤的年龄分布呈U型分布，散发MSI病例一般在老年（大于70岁），而家族性的更年轻一些（小于50岁） CRC原发灶与转移灶的MSI 研究尚未发现在转移灶有MSI-H，而原发灶没有的。说明MSI发生在肿瘤发生的比较早期的阶段 MSI的检测 PCR检测 Bethesda标准，包括5个定位：2个单核苷酸（BAT 25,BAT26),3个双核苷酸（D5S346，D2S123，D17S250）后来延伸至10个（BAT40，myb,TGFβRII, IGF2R,BAX) 最敏感的BAT40，BAT26，BAT25，myb（100.94.94.88%） 如何判断MSI MSI-H：2个或更多的位点不稳定性（大于30%的大标准） MSI-L: 1个位点不稳定性（10-30%的大标准） MSS：没有位点不稳定（小于10%） MMR蛋白的免疫组化 MLH1占90% 检测方法比较 IHC： MMR-deficient(dMMR) MMR-proficient(pMMR) PCR：MSI-H(微卫星高度不稳定) MSI-L(微卫星低度不稳定) MSS(微卫星稳定) MMR与MSI一致率>90% dMMR=MSI-H pMMR=MSI-L/MSS MSI-H 样病理特征 MSI-H 结肠癌具有相类似的临床病理特征 肿瘤内淋巴细胞浸润（每个高倍视野超过3 个淋巴细胞） 瘤周Crohn 样淋巴细胞浸润（肿瘤边缘淋巴组织/滤泡形成） 粘液腺癌/ 印戒细胞癌分化（高级别组织学分化） 髓样生长方式（预后好） 右侧结肠多见 癌细胞分化差（高级别）是预