实验五细菌芽孢染色法课件.pptVIP

实验五 细菌芽孢染色法 一、实验目的： 1.学习并掌握芽孢染色的方法； 2.观察芽孢的形状及着生位置。 二、实验原理： 芽孢具有厚而致密的壁，透性差，不易着色，而一旦染上颜色，脱色也比较困难。因此芽孢染色法的基本原则是：采用着色力强的染料，在加热条件下，延长染色时间以促进标本着色。然后采用脱色的方法使标本脱色，菌体颜色褪去，而芽孢上的颜色仍然保留。再用对照的染料进行复染，使菌体染上复染液的颜色，和芽孢形成鲜明的对比，容易辨认。  三、实验器材 显微镜，酒精灯，火柴，试管夹，载玻片，接种环，双层瓶，吸水纸，擦镜纸，蒸馏水； 孔雀绿染液，沙黄（番红）水溶液； 巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium)，37℃培养20小时； 四、实验步骤 1?．制备菌悬液加2滴水于空试管中，用接种环挑取3环菌苔于试管中，搅拌均匀，制成浓的菌悬液．? ?染色加孔雀绿染液2滴于小试管中，将试管置于沸水浴的烧杯中，加热染色15~20?min?。 ?涂片固定用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上，涂成薄膜，然后将涂片通过火焰3?次温热固定。 4. ?脱色水洗．直至流出的水无绿色为止． 5?．复染用沙黄水溶液染色2~3min?，倾去染液稍微用水冲去染液并用滤纸吸干残液． 6?．镜检干澡后用油镜观察．芽孢呈绿色，芽孢囊及营养体为红色．