（毕业论文）碱胁迫下野生大豆叶片蛋白质组的双向电泳分析2.docVIP

目 录 摘要 I 英文摘要 III 1 1 1.1 研究目的和意义 1 1.2 文献综述 1 1.2.1 盐碱地的危害及其改良手段 1 1.2.2 野生大豆在耐盐碱研究中的应用 4 1.2.3 蛋白组学在植物耐盐碱研究中的应用 5 1.2.4 蛋白质组学中的关键技术 8 1.3 课题来源与本研究的主要内容 11 1.3.1 本研究课题来源 11 1.3.2 本研究的主要内容与技术路线 11 2 材料与方法 13 2.1 碱胁迫下野生大豆的生理学分析 13 2.1.1 试验材料 13 2.1.2 试验方法 13 2.2 野生大豆叶片蛋白质组双向电泳体系的建立 17 2.2.1 试验材料 17 2.2.2 试验方法 18 2.3 碱胁迫下野生大豆叶片的双向电泳 24 2.3.1 试验材料 24 2.3.2 试验方法 24 3 结果与分析 27 3.1 碱胁迫下野生大豆的生理学分析 27 3.1.1 碱胁迫下野生大豆膜结构稳定性的分析 27 3.1.2 碱胁迫下野生大豆渗透保护物质积累的分析 28 3.1.3 碱胁迫下野生大豆抗氧化系统的分析 29 3.2 野生大豆叶片蛋白质组双向电泳体系的建立 32 3.2.1 野生大豆叶片总蛋白质浓度的测定 32 3.2.2 蛋白提取方法的确定 33 3.2.3 双向电泳上样量的确定 34 3.2.4 双向电泳条件的优化 36 3.3 碱胁迫下野生大豆叶片差异蛋白组的初步分析 38 3.3.1 不同处理时间野生大豆叶片总蛋白的双向电泳 38 3.3.2 碱胁迫下野生大豆叶片蛋白质组的差异表达分析 41 3.3.3 碱胁迫下蛋白点的等电点分布和分子质量分布 44 3.3.4 碱胁迫下差异表达蛋白点的表达模式分析 46 4 讨论 48 4.1 碱胁迫对野生大豆生理生化指标的影响 48 4.2 影响双向电泳重复性的因素 49 4.2.1 蛋白质提取方法的选择策略 49 4.2.2 双向电泳上样量的选择 49 4.2.3 双向电泳参数的优化方法 50 4.3 下一步工作展望 50 5 结论 51 致 谢 52 参考文献 53 攻读硕士学位期间发表的学术论文 63 CONTENTS Abstract in Chinese I Abstract in English III 1 Introduction 1 1.1 Purpose and significance of this research 1 1.2 Literature review 1 1.2.1 The harmless of saline-alkali soil and improved methods 1 1.2.2 The application in the study of salinity tolerance of Glycine soja 4 1.2.3 The application in plant salt-alkaline tolerance of proteomics 5 1.2.4 The key technology in proteomics 8 1.3 Source and main content of this research 11 1.3.1 Source of this research 11 1.3.2 Main content of this research 11 2 Materials and Methods 13 2.1 The determination of physiological indicators of Glycine soja under alkaline stress 13 2.1.1 Experimental materials 13 2.1.2 Experimental methods 13 2.2 Establishment of two-dimensional electrophoresis system 17 2.2.1 Experimental materials 17 2.2.2 Experimental methods 18 2.3 Two-dimensional electrophoresis of Glycine soja leaves under alkali stress 24 2.3.1 Experimental materials 24 2.3.2 Experimental methods 24 3 Result analysis 27 3.1 Physiological analysis of Glycine soja under alkaline stress 27 3.1.1 Effects of alkaline st