pcr引物设计及试题分析_张卓鹏.pdfVIP

生物·解题方略 PCR引物设计及试题分析 □ 张卓鹏 PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技 引物确定以后，可以对引物进行必要的 术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内 修饰，例如可以在引物的5′端加酶切位点序 复制出上百万份的DNA拷贝。这项技术有效 列；标记生物素、荧光素、地高辛等，这对扩增 地解决了因为样品中DNA含量太低而难于对 的特异性影响不大。但3′端绝对不能进行任 样品进行分析研究的问题，被广泛地应用于 何修饰，因为引物的延伸是从3′端开始的。这 遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因 里还需提醒的是3′端不要终止于密码子的第 克隆和DNA序列测定等各方面。近年来，有 3位，因为密码子第3位易发生简并，会影响扩 关PCR引物的考查成为高考生物“基因工程” 增的