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人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)elisa试剂盒使用说明书.doc 3页

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人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)elisa试剂盒使用说明书
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人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)elisa试剂盒使用说明书Elisakit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)【人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定中水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMB在酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。服务承诺:? 工作时间内免费的技术咨询和指导?。 为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性(免费代测)。2-8℃|有效期:6个月【人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)elisa试剂盒】样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L,150ng/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻混匀分钟甩干μl,空白孔除外。μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应。450nm波长依序测量各孔的度(OD值)浓洗涤液会有析出,稀释时可在水浴中加温助溶乘以0.2IU/L-6IU/L1

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