调节性T细胞专辑（二）.PDF

调节性T细胞专辑（二） (Regulatory T Cells) BD 的259D/C7 克隆——Foxp3 蛋白鉴定最佳抗体 抗体特异性的好坏，即抗体能否特异性地结合特定的抗原，是选择正确抗体的关键。由于抗体识别抗原的相对 较小区域，不同的抗体结构和结合位点都会影响抗原抗体结合的亲和力。在不同Foxp3抗体中157B/F4和86D/D6克隆 主要识别人类Foxp3中第一外显子（aa1-70 ），150D/E4克隆主要识别第二外显子（aa70-105），而206D/B1、236A/E7 和259D/C7克隆识别N末端（aa105-235 ）表位（图1B）。由于人Foxp3存在两种异构体：一种对应于经典的全长序列 （Foxp3），另一种缺少第二外显子 （Foxp3δ2 ），因而150D/E4克隆是无法检测exon2缺失亚型的。 Bridget C. Fox等对上述几种不同克隆的抗体对Foxp3的结合力进行了比较试验，结果发现，无论是免疫组化还是 流式结果BD的259D/C7克隆都表现出对Foxp3很强的反应（图1A）。而150D/E4和206/B1克隆在流式和免疫组化实验 中都表现出对Foxp3的低亲合力。在Western Blot实验中，259D/C7和206D/B1都能够很好的标记Foxp3亚型，236A/E7 的标记作用稍差些，而150D/A3克隆就无法检测到exon2缺失的亚型（图1C）。由此Fox BC等得出结论BD的259D/C7 克隆是Foxp3蛋白表达最敏感的检测抗体（研究发表在2008年Blood上，Defense of the clone: antibody 259D effectively labels human FOXP3 in a variety of applications ） 图1. 几种Foxp3 单克隆抗体结构和抗体结合位点示意图 图2. 不同克隆抗体对Foxp3结合力总结 氨基酸肽段 克隆 厂家 Flow 结果 IHC 结果 WB 结果 157B/F4 + exon1 86D/D6 + exon2 150D/E4 BL/EB - - - 206D/B1 BL - - + N 末端 236A/E7 BD/EB + ± 259D/C7 BD + + + 注：“- ”低亲和力 “± ”中等亲和力 “+ ”高亲和力 Fox B C et al. Blood 2008;111:3897-3899 基因公司为您提供多种Treg 相关抗体试用装，欢迎您免费体验哟~ 货号 名称