棉花S―腺苷甲硫氨酸合成酶基因克隆及表达探析.docVIP

棉花S―腺苷甲硫氨酸合成酶基因克隆及表达探析 　　摘要：利用iTRAQ技术从陆地棉（Gossypium hirsutum L.）HM-40中筛选并克隆到S-腺苷甲硫氨酸合成酶GhSAMS基因。GhSAMS基因的开放阅读框全长为1 182 bp，编码393个氨基酸，预测GhSAMS蛋白质含有15个磷酸化位点，推测其功能的行使可能与激酶磷酸化相关，进化分析表明S-腺苷甲硫氨酸合成酶与茶树（Camellia sinensis）的SAMS蛋白质相似性最高。qRT-PCR分析表明，在接种黄萎病菌VD07菌系后，GhSAMS表达量逐渐增加，随着接种时间的延长，其相对表达量随之增加，推测其在陆地棉抗黄萎病防卫反应中可能起重要作用。在嫁接棉株中，利用VIGS技术成功地沉默GhSAMS基因，然后对沉默棉株接种黄萎病菌VD07，鉴定其病情指数为62.5，抗性级别为感病；而转化空载体和未接种载体处理的嫁接棉株病情指数分别为30.0和31.2，抗性级别为耐病，表明GhSAMS基因沉默后嫁接棉对黄萎病的抗性丧失。推测GhSAMS基因在陆地棉抗黄萎病的过程中可能起重要作用 关键词：棉花（Gossypium hirsutum L.）嫁接；S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因；黄萎病；VIGS 中图分类号：S562 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）23-6261-06 DOI：10.