RT-PCR法检测地龙及地龙溶栓胶囊中口蹄疫病毒.pdf

fi}l学隧学诼z 中药制剂工程与技术 2014 V o1．15 N o．6 RT—PCR法检测地龙及地龙溶栓胶囊中口蹄疫病毒 董培智 ，朴晋华 (山西省食品药品检验所，山西 太原030001) 摘要 目的：用RT-PCR法检测地龙及其制剂溶栓胶囊中是否存有口蹄疫病毒。方法：提取样品总RNA，用一步法RT— PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后 ，以电泳图中待测样品扩增产物是否出现与阳性对照相同的条带来判断样品 是否为阳性。结果：电泳结果显示，不同效期3批溶栓胶囊和地龙冻干粉原料 口蹄疫病毒检测结果均为阴性，提示其不 合有 口蹄疫病毒。结论：该法简便、快捷，具较高的特异性和灵敏性，可以为中药材及制剂中病毒的检测提供参考。 关键词 地龙；溶栓胶囊；口蹄疫病毒；RT—PCR；病毒测定 中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1671—0258(2014)06—0030—03 Detectionoffoot-and-mouthdiseasevirusinPheretimaasiaticafreezedriedpowderand DilongRongshuancapsulesbyRT—PCR method DongPeizhi，PiaoJinhua (ShanxiInstituteforFoodandDrugControl，TaiyuanShanxi030001) Abstract Objective：Todetectfoot—and—m0uthdiseasevirusinPheretimaasiaticafreezedriedpowderanditsprepara- tions(Rongshuancapsule)byRT—PCRmethod．Method：I10talRNAofsampleswasextractedandwasamplifiedbyone— step RT-PCR method．Theneleetrophoregram ofamplification productofsampleswasdetected．ResuIt：Itshowed that f00t—and—mouthdiseaseviursdeterminationresultsof3batchesofRongshuancapsulesamplesandraw materialofPhere— timaasiaticawerenegative．Conclusion：One—stepRT-PCR methodissimple，rapid，specificand sensitiveandcouldbe providedasareferencefordetectionofvirusinChinesecurdedmgandpreparations． Keywords Pheretimaasiatica；Rongshuancapsule；foot—and-mouthdiseasevirus；RT—PCR；viresdetection 中药材地龙为钜蚓科动物参环毛蚓、通俗环毛 量水疱，高烧不退，严重影响畜产量。有个别 口蹄疫 蚓、威廉环毛蚓或栉盲环毛蚓的干燥体n]。地龙溶栓 病毒的变种可传染给人，人一旦受到其传染，除出现 胶囊为鲜地龙经加工制成的肠溶胶囊，收载于溶栓 发烧、水泡，伴有头痛、恶心、呕吐或腹泻外，有时可 胶囊 新《药转正标准》第 l9册[，主要功能为清热定 并发心肌炎。因此，有必要对地龙及制剂溶栓胶囊中 惊、活血通络，用于中风半身不遂、肢体麻木、高血压 口蹄疫病毒进行检测。 等。在以前的研究中，笔者将生物检定中量反应平行 目前检测FMDV的方法有动物接种、病毒分离 线法引入溶栓胶囊的蚓激酶活性测定中，对其进行 培养、血清中和试验、微量中和试验(VNT)、补体结 方法学验证 ，根据验证结果修订了溶栓胶囊的效价 合试验(CFT)、间接血凝试验、乳胶凝集试验、免疫 测定方法 口]。另有专家提出需对地龙中是否存在人 扩散试验、酶联免疫吸附试验 (EusA)、生物传感 畜共患的病毒进行考察，以保证临床用药的安全。 器、基因芯片