真核基因组DNA的分.pptVIP

真核基因组DNA的分离纯化 核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子，原核生物的染色体DNA、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子；有些噬菌体DNA为单链环状分子； 大多数生物体内RNA分子均为单链线性分子并具有不同的结构特点，如真核生物mRNA分子多数在3＇端带有polyA结构。 * 分离纯化核酸总的原则： ①应保证核酸一级结构的完整性（完整的一级结构是保证核酸结构与功能研究的最基本要求）； ②排除蛋白质、脂类、糖类等其他分子的污染 。 ③无其他核酸分子的污染（如抽提DNA分子时应去除RNA分子）。 * 分离核酸 应注意以下几点： ①减少化学因素对核酸的降解， ②减少物理因素对核酸的降解： ③防止核酸的生物降解： 进行核酸分离时最好新鲜生物组织或细胞样品，若不能马上进行提取，应将材料贮存于液氮中或-70℃冰箱中。 * 核酸提取的主要步骤： 一般为破碎细胞，去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子，去除其他不需要的核酸分子，沉淀核酸以去除盐、有机溶剂等杂质，最后得到纯化的核酸。 * 一、外周血白细胞DNA提取（NaI法） 【实验目的】 掌握NaI法提取外周血白细胞DNA的原理和方法。 * 【实验原理】 从全血制备白细胞DNA，可用双蒸水溶胀红细胞及白细胞