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- 2017-06-26 发布于河南
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630490 酵母双杂交文库构建实验流程(clontech)
酵母双杂交文库构建基本实验流程
第一链cDNA 合成
1. 准备: 高质量的Poly A 或总RNA
2. 在微量离心管中混匀以下试剂:
+
1–2 μl RNA 样本 (0.025– 1.0 μg poly A 或0.10–2.0 μg 总RNA)
1.0 μl CDS III 或 CDSIII/6 引物
1–2 μl 去离子水(补齐体系到4.0 μl)
4.0 μl 总体积
注意: 对照实验时,请使用1μl *1μg+ 的对照RNA。CDSIII = Oligo-dT ;
引物CDSIII/6 =随机引物
3. 72°C ,孵育2 m
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