dsDNA定量检测的PicoGreen荧光染料在TBS-380微型荧光.PDFVIP

Turner BioSystems Applications Note 用于 dsDNA 定量检测的 PicoGreen®荧光染料 在 TBS-380 微型荧光计上的应用 1.应用说明 在分子生物学的试验过程中，PicoGreen® dsDNA 定量试剂盒是荧光检测双链 DNA 并进行定量 的一种产品，这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术中的：cDNA 文库的构建；用于亚克隆的 DNA 片段纯化及应用，比如进行 DNA 定量、产物扩增 1，2 和引物的进一步检测 3，4。 核酸浓度的常用检测方法是在 260nm(A260)处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单 链核酸和蛋白质对信号具有很大的影响，并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰，无法区分 DNA 和 RNA，而且这种方法不灵敏性（5μg/mLdsDNA 溶液 A260=0.1 ）。Hoechst （双苯酰亚胺）作为 灵敏的荧光核酸染料也有多此类问题，用 Hoechst 33258 Dye 检测时，对 dsDNA 具有某种程度的选 择性，在蛋白质存在的情况下没有表现出明显的荧光增强；在 DNA 浓度低至 10ng/mL 时，也可定量 检测 DNA 浓度[5]。 Turner Biosystems 的TBS-380 微型荧光计结合