含川芎嗪玻璃化冻存液对组织工程化神经治疗大鼠坐骨神经缺损影响实验的研究.pdf

含川芎嗪玻璃化冻存液对组织工程化神经治疗大鼠坐骨神经缺 损影响的实验研究 摘 要 目的：探讨利用含川芎嗪的玻璃化冻存液冻存的大鼠异体神经与神经干细 胞(NSCs)联合移植治疗大鼠坐骨神经长节段缺损的作用和机制。方法： 条神经段，随机分为两组冻存，即含川芎嗪的玻璃化冻存液．196℃冻存3 川芎嗪玻璃化冻存液冻存后的大鼠异体坐骨神经端端缝合到大鼠一侧坐骨 神经1．5厘米缺损模型上，并通过微量注射器行神经外膜下注射浓缩的基因 修饰NSCs。A组(对照组)：将切下的坐骨神经倒转后原位端端缝合，于 神经外膜下注射相同体积生理盐水。B组(对照组)：将单纯普通冻存液冻 存后的大鼠异体坐骨神经端端缝合到大鼠缺损坐骨神经上，于神经外膜下 比(患侧／健测)、移植神经横断面髓鞘面积比例、移植神经段组织学观察。 间比较采用方差分析及LSD法，结果以均数士标准差表示，P<0．05为有统 组(实验组)移植神经段荧光显微镜观察可见Ad．GFP转染的神经干细胞存 活并分化为神经元及神经胶质细胞，A、B组移植神经段荧光显微镜下未见 荧光。移植神经段大体观察A组及C组桥接神经直径较B组更接近原坐骨 神经，且神经外膜血管生长跨过桥接神经吻合口，2、4、8周组相较无显著 性差异。结论：1、新生SD大鼠大脑皮层组织能提取、培养与传代大量神 胞。经AD—GFP病毒转染后，神经干细胞传代及分化未受影响；2、神经干 细胞可与含川芎嗪的玻璃化冻存液冻存的异体坐骨神经在受体大鼠体内共 存并分化成神经元细胞及神经胶质细胞，促进神经修复，减轻肌萎缩；3、 含川芎嗪的玻璃化冻存液冻存的异体神经与NSCs联合移植可促进大鼠坐 骨神经缺损的修复。 关键词：外周神经长段缺损神经干细胞异体神经移植修复 oninfluenceofvitrified contain Study cryopreservation ‘ 1 ‘ ‘ ‘‘ ●■ ■ 一 一 ● 0n delectofsciaticnerveinratwith ngUStraZlnetreating nerve tissue—engineered Abstract thefunctionandmechanismof with Objective：Tostudy transplantingallograft nerve vitrified of fluid cryo—preservedby cryopreservationligustrazine combinedwithNSCs defectofsciaticnervein treatinglong stem from rat．Methods：(1)Neuralcells(NSCs)were were newbornratscerebralcortexandNSCs transfectedAdenovirus by with Gre