实验三、血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳.pptxVIP

实验三 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳;注意：自己带铅笔、尺子;一、实验目的;二、实验原理;电泳速度的方向：;E：电场强度; Q：粒子所带的净电荷; r：粒子半径； η：溶液的粘度;（i）粒子所带电荷越多，半径越小，泳动速度就越快 （ii）所带电荷越少，半径越大，泳动速度就越慢;2.电泳分离蛋白质的原理; 血清蛋白质的等电点为4.8～7.5，均低于8.6，因此电泳时常采用pH8.6的缓冲液。此时，蛋白质解离带负电荷，在电场中向正极移动。 由于各种血清蛋白的等电点不同，在同一pH下带的电荷数也不同，加上各蛋白质的分子大小也有差别，因此在电场中的移动速度不同。 带电荷多、相对分子量小的蛋白质泳动较快，带电荷少、相对分子量大的泳动较慢。 这样各种血清蛋白质在同一时间内泳动的距离就不同，从而可将血清蛋白分离成数条区带。 ;4.??纤膜分离血清蛋白质的原理;醋纤膜分离血清蛋白质的方法;三、主要试剂与器材：;四、操作步骤：;不同的点样方式;2cm;2cm;2cm;3.搭桥：首先将双层滤纸铺好，分别放置于电泳槽两端，其下端要浸入缓冲液中。注意：?无光泽面朝下；?血清线不碰到盐桥上的滤纸；?膜的+”“-”与电泳槽的“+”极、“-”极方向一致。;水平电泳槽;4.电泳：红正黑负。 电压：100V。 电泳时间约 60mi