贴壁细胞培养、传代与活性测定等.pdfVIP

贴壁细胞系的传代 改编自Freshney, R.I., 1994。动物细胞培养：基本技术手册。第3版，Wiley-Liss ，纽约，美国。 概述 讨论 从培养容器中去除培养基，PBS 2 血清中含有胰蛋白酶的抑制剂。 5.加入含有血清的培养基（3–10mL/75cm 漂洗一下，将胰蛋白酶加入细胞， 孵 瓶面积），上下吹打细胞，直到细胞分 因此在第2步处理的时候，去除痕量的 育，加入含有血清的培养基终止胰蛋 散成单细胞悬液。 血清非常重要。 白酶的反应，分散细胞，稀释后放回 培养箱。 6.用血球计数板或库尔特粒度仪计数 第5步中培养基中含有的血清会使 并将细胞稀释到合适的接种浓度。 残留的胰蛋白酶失活并保护细胞免受