FRET 荧光共振能量转移.pptVIP

FRET 原理(Principle) 荧光标记利用FRET技术检测不发光分子间相互作用的策略 * * 陈 同 生 华南师范大学信息光电子科技学院 荧光共振能量转移Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) 分子能级与荧光 S0 S1 T1 hn0 hn1 hn2 2. 荧光（Fluorescence)：当处于基态的分子吸收光能后进入激发态，并且立即返回基态并以光的形式释放能量，这种光称为荧光。 4. 激发(Excitation, Ex)和发射(Emission, Em)光谱（Spectra): 1. 能级（ Energy Level）：原子的可能状态是不连续的，因此各状态对应能量也是不连续的。包含电子能级、振动能级和转动。 3. 磷光（Phosphorescence）:分子从激发三线态返回基态以光的形式释放能量。 CFP Ex. 440nm Ex. 470nm Em. 470nm YFP Em. 535nm 荧光共振能量转移(FRET)现象 3. FRET现象的特征: 选择性激发供体,却能检测到受体发射的荧光 1. 供体(Donor, D) Donor 2. 受体(Acceptor, A) Acceptor FRET的条件 发生FRET需要三个条件： 1、供体分子的发射光谱和受体分子的吸收光谱必须有显著的重迭，一般大于 3