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小鼠白细胞介素12基因转染及其在黑色素瘤细胞b16f10中的表达
1092 Chinese Journal of Pathophysiology 2003, 19( 8) : 1092- 109
[ ] 1000- 4718(2003) 08- 1092- 05
12
B16F10 *
1 2 1 2 1
赵 军, 孙奋勇 , 李 辰 , 颜艳灵, 张翼飞
1 2
( , , 510 32)
[ ] : 12(mIL- 12) B1 F10 :
DNA mIL- 12 pcDNA3. 1 , B1 F10 ,
, PCRRT- PCR Western blot mIL- 12 B1 F10 : DNAmRNA
3 mIL- 12 B1 F10 : mIL- 12
B1 F10 , IL- 12
[ ] 12; ; ;
[ ] R3 3 [ ] A
mIL- 12
, , 5 17% - 50%, p35 p40 ,
, ( internal ribosome entry site, IRES) ,
mIL - 12
R
12( interleukin - 12, IL- 12) ( neomycin resistance, Neo )
, IL- 12 pcDNA3. 1( - ) / myc- HisA( 5 500 bp,
pcDNA3. 1) , Invitrogen
[ 1]
IL- 12 1. 2 菌珠及细胞系 DH5
[ 2, 3]
, IL- 12, B1 F10
1. 3 主要试剂 DMEM( Dulbeccos
[4]
, Modified Eagle Medium, Gibco- BRL ) ;
IL- 12 ( ) ;
IL- 12, ( Sigma ) ; Geneticin( G418, Gibco-
BRL ) ; ( electroporation buffer, Ep
B1 F10 , pendorf ) ; LB( Luria- Bertani ,
IL- 12( murine IL- 12, mIL- 12) , Oxoid ) ;
B1 F10 , , (Biowest ) ; DNA markerTaqDNA
T4DNA EcoRI( Takara
) ; ( diethyl py
rocarbonate, DEPC, Sigma )
( Omega ) ;
1 RNA -
1. 1 载体 mIL- 12 ( Qiagen ) ; DNA
( retrovirus,RV) ( )
mIL- 12p70 ( R D ) ;
[ ] 2003- 03- 31 [ ] 2003- 05- 19 IgG(
* [] ( No. ) marker ( Amersham Biosciences
A2002353) ) ( Sigma )
Tel: 020- E- mail:lichen503@ 1 3. com
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