小鼠骨髓间充质干细胞的培养尧鉴定和survivin的表达研究.pdfVIP

14 卷 5 期 生命科学研究 灾燥造援员4 晕燥援5 圆园10 年 10 月 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻 砸藻泽藻葬则糟澡 Oct. 圆园10 5 期 鼠骨髓间充质干细胞的培养 鉴定和Survivin 的 表达研究 青松 苟 欣* ， 重庆医科大学 附属第一医院泌尿外科 中国重庆4000 16） 摘 要院 为培养及鉴定小鼠来源骨髓间充质干细胞 并测定细胞中Surv iv in 的表达情况 采用全骨髓培养法 获取骨髓间充质干细胞 绘制生长曲线 流式细胞仪检测细胞表面标志物 行成骨尧 成脂检测 RT PCR 测定 Surv iv in 表达情况. 结果表明培养出的细胞呈长梭状成纤维细胞样 经流式细胞仪检测细胞表面高表达 CD29尧 CD34尧 CD44 尧 SCA 1 低表达CD117曰 细胞曲线显示传代细胞培养 1~3 d 生长缓慢 第4 d 生长加快 并于第7 d 达到高峰曰 成骨诱导20 d 经茜素红染色呈红色结节 成脂诱导 14 d 油红O 染色显示有大量脂质 沉淀曰 RT PCR 结果显示Surv iv in mRNA 阳性表达. 经全骨髓培养法可 培养出大量骨髓间充质干细胞 同时 s urv iv in 在小鼠骨髓间充质干细胞中正常表达 提示可能参与骨髓间充质干细胞抗凋亡过程. 关键词院 骨髓间充质干细胞曰 培养曰 鉴定曰 Surv iv in 中图分类号院 Q291 文献标识码院A 文章编号院 1007 7847 渊2010 冤05 0381 05 Culture ，Identification of Mice Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells and the Expression of Survivin ZHOU Qing song ，GOU Xin* Department of Urology ，the First Affil iated Hosp ital ，Chongqing Medical Unive rs ity ，Chongqing 4000 16，China） Abstract ：To culture and identify mice bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs ），and to detect the expression of Surv iv in ，BMSCs by whole bone marrow adherence method was adopted ，charted the growth curves of the passage BMSCs ，the specific surface markers were detected by flow cytometry FCM ）， osteogenic and adipogenic induction was performed on BMSCs ，expression of Surv iv in mRNA in BMSCs determined by RT PCR. The results showed that the cells displayed fusiform shape as fibroblasts ，the surface highly express CD29 ，CD34 ，CD44 ，SCA 1，lowly express CD117；the