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- 2017-12-19 发布于河北
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PCR联用HPLC快速筛选野生冠菌素生产菌
PCR联用HPLC快速筛选野生冠菌素生产菌
王春燕 胡堂路 姜峰 谭伟明 李召虎 段留生
中国农业大学农学院/植物生理生化重点实验室/教育部植物生长调节剂工程研究中心 中国农业大学园艺学院
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摘????要:
冠菌素 (coronatine, COR) 是由丁香假单胞菌 (Pseudomonas syringae) 某些致病变种产生的一种新型植物生长调节剂。建立冠菌素生产野生菌快速检测方法对于丰富其菌种资源、推进冠菌素的研究和应用具有重要意义。本研究根据冠菌素合成相关功能基因cor S、cor R设计2对特异性引物, 利用PCR技术及高效液相色谱 (high-performance liquid chromatography, HPLC) 法从32株野生菌中筛选冠菌素产素菌。结果表明, 设计的特异性引物在以冠菌素产生菌模式菌为模板时能特异性扩增出目的片段, 分别为850bp (cor S) 和450 bp (cor R) , 以非产素参考菌株为模板时不能扩出此片段, 具有较好的特异性;用该PCR方法成功从32株野生菌中筛选获得3株冠菌素产素候选菌, 经HPLC复筛后, 其中2株发酵产物检出冠菌素, 其产量分别为6.5和2.1 mg
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