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- 2017-12-19 发布于浙江
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DNA Extraction 法医学
DNA ExtractionDNA提取 中山医学院法医物证教研室 吕德坚 DNA提取的原因 DNA的分型需要DNA的直接参与反应过程 DNA位于细胞内,细胞内可能含有抑制反应的蛋白或其他细胞成份 DNA和蛋白质结合在一起 不同的反应需要应用不同的DNA 没有杂质纯DNA可使反应达到最佳 法医学生物检材常含有抑制酶、PCR反应的物质 DNA提取方法 不同的检材用不同的方法 不同的检材量可能使用不同方法 和检材的细胞类型有关 可根据肉眼、检查、显微镜下以及预试验来决定DNA的提取方法 DNA提取的主要方法 有机法(酚/氯仿法) Chelex法 FTA纸法 硅珠法、磁珠法 碱裂解法 DNA EXTRACTION ORGANIC CHELEX FTA PAPER OTHERS NON-ORGANIC (6M NaCl) QUICK DIRTY (0.2M NaOH) QIAamp DNA提取的基本一般过程 破膜:裂解细胞膜、核膜 去圬剂:SDS,低渗 破坏蛋白质 PK、加热 提纯DNA 沉淀 去除杂质 吸附杂质 有机法(organic extraction) 经典的DNA抽提法 先用SDS破膜,PK消化蛋白质,释放DNA 用酚一氯仿萃取DNA溶液中的蛋白质类有机物质,而保留DNA于水相溶液中 再用无水乙醇脱水,使DNA沉淀出来 其提取的DNA分子结构完整,纯度较高,可抽提样本量大的D
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