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- 2017-12-29 发布于江苏
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血凝试验
实训六.病毒液收取与血凝试验(HA)
一.试验的目的
掌握鸡胚培养病毒的收集方法
掌握微量血凝试验的整个操作过程
二.试验原理
一些动物红细胞(如鸡、豚鼠等)以及人“O”型血红细胞上有流感病毒受体,遇流感病毒可产生红细胞凝集现象,简称血凝。
三.实验材料
鸡胚或病毒液、恒温箱、蛋盘、镊子、酒精灯、3%的碘酊棉球、75%的酒精棉球、无菌瓶子、96 孔微量血凝反应板、微量移液器、吸头、微量震荡器、生理盐水、病毒阳性血清、1%的鸡红细胞等。
四.方法步骤
1.收毒:
①将蛋胚放在冰箱内冷冻半日或一夜,使血管收缩,以便得到无胎血的纯尿囊液。
②用碘酒消毒气室处的卵壳,并用灭菌剪刀除去气室的卵壳。切开壳膜及其下面的绒毛尿囊膜,翻开到卵壳边上。
③将鸡卵倾向一侧,用灭菌吸管吸出尿囊液。一个蛋胚约可收获6ml左右尿囊液。若操作时损伤了血管,则病毒会吸附在红细胞上,影响后续实验。收获的尿囊液经无菌试验后可在4℃以下的温度中保存。
④观察鸡胚,看有无典型的症状。
15-30分钟
血凝试验流程图
振荡1min后
五.结果与分析
凡能使鸡血红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数, 称为该病毒的血凝度。
正确读出血凝结果
补充.实验报告的撰写
一.实验目的
二.实验原理(可省略)
三.实验材料
四.实验操作/方法/内容步骤
五.实验结果与分析
注意:要简明扼要,结果要清晰。
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