微生物细胞破碎53pro复性.pptVIP

总原则： 控制时间、温度、pH值，减少与空气接触的机会，设计好各组分的分离顺序. 细胞破碎的必要性 细胞壁的组成与结构 微生物细胞壁的形状、强度取决于细胞壁的组成以及它们之间相互关联的程度。 内因：连接细胞壁网状结构的共价键; 外因：各类微生物的遗传信息、培养条件、菌龄、外界环境等。 破碎程度的评价 破碎程度常用细胞破碎率（%）表示。 破碎率定义为被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分比数，即： Y（%）=[（N0-N）/N0]*100 其中N0——原始细胞数量； N ——经t时间操作后保留下来的未损害完整细胞数量。 N0和N的确定方法： 直接计数法：通过平板计数技术或血球细胞器上用显微镜观察，直接对适当稀释后的样品进行计数。 间接计数法：在细胞破碎后，测定悬浮液中细胞释放出来的化合物的量（eg.可溶性蛋白、酶等）。 细胞破碎技术 常用的破壁方法 1、常用的破壁方法——珠磨法 几种常见珠磨器 破碎作用遵循一级动力学定律： 破碎的速率和效率是所有操作参数的函数，如：珠体的大小、珠体的装量、细胞浓度、操作温度、料液性质、搅拌器转速与构型等。 此外，与搅拌器的设计和研磨腔的结