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- 2018-05-07 发布于福建
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课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
问题导学
一、PCR的原理
活动与探究1
1.细胞内DNA复制需要的基本条件有哪些?该条件在DNA复制中起何作用?
2.什么是引物?它有什么特点?用于PCR的引物一般长度是多少?
3.讨论:DNA合成的方向有什么特点?两条子链的合成起始于DNA的同一端吗?
4.PCR技术中,高温能使DNA双链解旋,但也会导致DNA聚合酶失活,如何解决?
迁移与应用1
PCR过程中起催化作用的酶是( )。
A.解旋酶 B.RNA聚合酶
C.Taq DNA聚合酶 D.DNA连接酶
细胞内DNA复制与PCR技术的比较
细胞内DNA复制 PCR 不
同
点 解旋 解旋酶催化,部分解旋解链 95 ℃高温解旋解链,双链完全分开 酶 解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶 Taq DNA聚合酶 能量 ATP 不加 温度 体内温和条件 95 ℃→55 ℃→72 ℃ 特点 整个DNA复制,只在分裂间期复制一次 目的基因片段,按需要无限扩增 相同点 ①需DNA模板;②需脱氧核苷酸作原料;③子链延伸方向都是从5′端到3′端;④都遵循碱基互补配对原则,半保留复制 注:解旋酶的作用是使DNA两条链的氢键断开,而DNA聚合酶都是催化形成磷酸二酯键的。
二、PCR的反应过程
活动与探究2
1.PCR一般要经历30多次循环,每次循环可以分为哪几步?
2.P
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