噬菌体展示技术课件.pptVIP

噬菌体展示技术 噬菌体可被分为溶菌周期和溶源周期两种不同的类型。在溶菌周期，噬菌体将其感染的宿主细胞转变成为噬菌体的“制造厂”，产生出大量的子代噬菌体颗粒。实验室常将只具有溶菌生长周期的噬菌体叫作烈性噬菌体。 溶源生长周期是指噬菌体DNA被整合到宿主细胞染色体DNA上，成为它的一个组成部分，感染过程中不产生子代噬菌体颗粒。具有这种溶源周期的噬菌体被称为温和噬菌体。 噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白基因与噬菌体特定蛋白基因在其表面进行融合表达的新技术。该技术实现了表型与基因型的统一。随着噬菌体展示技术的进一步发展，其优越性被越来越多的实验室所认识，使得该技术的使用范围不断扩展，也使该技术得以不断的完善和发展。 原理 将编码“诱饵”蛋白的DNA片段插入噬菌体基因组，并使之与噬菌体外壳蛋白编码基因相融合。重组噬菌体侵染宿主细菌后，复制形成大量带有杂合外壳蛋 白的噬菌体颗粒，直接用于捕获靶蛋白库中与 “诱饵”相互作用的蛋白质。 噬菌体展示系统的分类 展示系统分为：丝状噬菌体展示系统、T7噬 菌体展示系统、T4噬菌体与lamda噬 菌体展示系统 所展示内容包括：随机肽段、天然肽段、 cDNA、抗体、抗体片段等等 　　 筛选方式包括：体外筛选和体内筛选 用抗体、受体、核酸、以及某些碳水化合物可以从噬菌体随机肽库中筛选出与之结合的肽段，因此在抗原表位分析、分