核素标记化合物检验核医学.pptVIP

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  • 2018-06-08 发布于贵州
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核素标记化合物检验核医学

A、方法学原理: 氯胺-T(Chloramine T,Ch-T)化学名称:N-氯代对甲苯磺酰胺钠盐,是一种温和的氧化剂,在水中形成次氯酸,将阴离子的I-氧化为分子态的I0或I+,在弱碱性(pH7.5)的环境里能与蛋白质或多肽的酪氨酸残基苯环上的H+发生置换反应,制得碘标记物。 思考题 1、蛋白质、多肽碘标记的原理是什么? 2、常用的蛋白质、多肽碘标记的方法有? 3、何谓辐射自分解? 4、如何控制辐射自分解? 2、间接标记法 又称联接标记,用于标记分子上不含酪氨酸、组氨酸或色氨酸残基,或该残基位于分子的活性基团上,直接标记后影响分子生物活性的蛋白质或多肽。 先将放射性碘标记在一个较为活泼的载体分子上(如Bolton-Huntor试剂),然后再将这个小分子蛋白质或多肽结合,完成标记。 蛋白质、多肽的碘标记 间接标记法特点 避免了蛋白质和氧化剂直接接触,防止在碘标记过程中氧化剂对标记分子的损伤; 需经二步标记,碘的利用率及标记率均很低; 标记时需引入一个较大的联接剂,对小分子的肽类的生物活性有影响,不适于MW 10000的小肽。 蛋白质、多肽的碘标记 (三)、核酸的碘标记 核酸是重要的生物大分子,其放射性碘化标记是将放射性碘标记到构成单元的碱基上,如尿嘧啶和胞嘧啶的嘧啶环上。方法:先将DNA加热到70℃,使之解析成单股的DNA,再用氧化剂(三氯化铊、浓HNO3)将离子碘

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