3贴壁细胞和悬浮细胞传代方法上有什么不同.PPTVIP

实验三、细胞的传代与冻存 什么时候传代？ 细胞消化的最佳程度 三、实验材料及设备 1. 细胞 人宫颈癌HeLa 细胞 人胃癌BGC-823细胞 2. 试剂 胰酶、DMEM培养基、血清、DMSO、抗生素 3. 仪器 超净工作台、CO2培养箱、倒置相差显微镜 4.其它用品： 培养瓶，试管，移液管，巴斯德吸管，废液缸，75％酒精棉球，酒精灯 5.点燃酒精灯；取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮头；过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。 6.将培养用液（90mL) 瓶口用75%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。 7. 打开血清（10.5mL) 瓶，瓶口过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。 8. 无菌吸取10mL血清加入到培养液（90mL)中，用微量移液器加入双抗100μL轻轻混匀，配置完全培养基。 9. 在血清中（剩余0.5mL) 加入4mL完全培养基轻轻混匀，加入0.5mL DMSO（冻存保护剂），轻轻混匀即为冻存液 。 思考题 1.试述传代培养的步骤和注意事项，并指出哪些是关键步骤? 2.细胞胞传代培养的目的是什么? 3.贴壁细胞和悬浮细胞传代方法上有什么不同? 4