地塞米松降解新基因的探讨-ChinaXiv.PDFVIP

地塞米松降解新基因的探讨 1 1 1 1 2 3 1 张进 ，斯丹 ，杨致邦 ，熊玉霞 ，马廉举 ，李津阳 ，蒋仁举 * 1.重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室 重庆 400016； 2.重庆医科大学药学实验教学中心 重庆 400016； 3.重庆医科大学临床医学2016级； 摘要 目的 探讨地塞米松降解代谢新基因，为构建高效、稳定的地塞米松降解基因工程菌 提供思路。方法 根据新发现的地塞米松降解菌Burkholderiasp.CQ001 （B.CQ001）全基因 组测序和生物信息学分析，筛选疑似与地塞米松代谢相关基因。提取B.CQ001 总RNA 逆转 录为cDNA，以cDNA 为模板，利用PCR 技术快速克隆经实时荧光定量PCR 技术（RT-qPCR） 1 验证筛选出的新基因，测序鉴定后连接原核表达载体pET-28a-c(+)，构建重组质粒 v 2