waters液相色谱仪的维护与常见故障.doc

Waters HPLC 仪器培训讲座 2008.10.22 蒙牛 ?2007 Waters Corporation 培训时间安排 ? Waters HPLC 仪器的使用和保养相关知识。 ? 2008-10-22 下午 14:00-14:40 ? 提问10分钟 ===================================== ? Waters HPLC 仪器常见故障以及处理方法。 ? 2007-6-29 下午 14:50-15:30 ? 提问10分钟 ?2007 Waters Corporation 2 Waters HPLC 仪器的使用和保养 相关知识 ?2007 Waters Corporation 仪器配置 2695+柱温箱 2489 Empower2 ?2007 Waters Corporation 5 流动相及溶剂瓶 使用HPLC试剂/溶剂，含缓冲 盐的流动相过0.45μm膜除去微 粒物质;更换流动相时,应彻底清 洗，防止交叉污染。 定期清洁溶剂瓶及附件，防 止长微生物。 ?2007 Waters Corporation 6 输液泵 2695 ?2007 Waters Corporation 7 输液泵 密封垫易损坏引起故障，每天实验结 束一定要认真冲洗泵,减少密封垫损耗， 并注意防止堵塞,使用缓冲盐流动相时,更 要小心。 使用HPLC级试剂,注意泵压力不要太高, 要适当调整压力,一般压力上限在3500- 4000PSI，下限为50PSI，注意防止因泵堵 塞造成压力过高损坏柱塞杆或烧坏电机 。 ?2007 Waters Corporation 8 输液泵 正确使用您的色谱泵： ? 使用高品质的溶剂 ? 溶剂过滤（注意滤膜的选择） ? 脱气溶剂 ? 柱塞杆清洗 ? 注意调节流量时的变化速度 ?2007 Waters Corporation 9 进样器 2695 ?2007 Waters Corporation 10 进样器 停机前一定冲洗干净进样 器内残留的样品或缓冲盐，防 止样品和无机盐沉积造成样品 交叉污染，硬件磨损或管路堵 塞。 注射器，样品瓶最好使用 仪器自配的，不要用其它仪器 的。 ?2007 Waters Corporation 11 柱—防止柱性能下降 1 溶剂的化学腐蚀性不能太强； 2 避免颗粒物在柱头沉降； 3 柱压不能太高，防止冲击太大； 4 流动相pH值小于7时，最好用大粒度同种填料的预 柱； 5 柱头加滤片（烧结不锈钢), 需要时加保护柱； 6 经常清洗柱； 7 长时间不用时要保存好,一定要洗去缓冲盐,加入大 于10%有机溶剂，将柱两端拧紧,保持柱填料湿润。 ?2007 Waters Corporation 12 检测器 2489双波长紫外检测器 ?2007 Waters Corporation 13 检测器 保持清洁，每天用后与色谱柱一起 清洗； 使用脱过气的流动相，防止气泡滞 留池内； 检测器灯有一定寿命，超过4小时不 用时可以不开灯。 ?2007 Waters Corporation 14 数据处理系统 Waters Empower2 ?2007 Waters Corporation 15 数据处理系统 Empower色谱工作站: 尽量使用正版软件； 防止网上病毒损坏软件； 不装杀毒软件； 不做与实验无关的操作。 ?2007 Waters Corporation 16 提问时间 ?2007 Waters Corporation 17 Waters HPLC 仪器常见故障 以及处理方法 ?2007 Waters Corporation 1、流动相及溶剂瓶 ?脱气不充分(噪声大，出毛刺) 用He脱气（600，2695） 真空脱气（Degasser，2695，1525） 超声脱气（超声波清洗器） ?2007 Waters Corporation 19 1、流动相及溶剂瓶 ?流动相供给不畅，泵压力不稳 流动相接近用完 溶剂滤头堵塞 （有颗粒，长霉） 溶剂过滤头 ?2007 Waters Corporation 20 1、流动相及溶剂瓶 ?溶剂瓶或流动相被污染 产生有规则的噪声； 基线上升，梯度洗脱出鬼峰； 原因: 溶剂质量差（含杂质多）； 配流动相的玻璃器皿不合格,微生物 影响； 配制流动相的操作不当（过滤、脱 气、搅拌). ?2007 Waters Corporation 21 2、输液泵 ? 单向阀 a.球和阀座粘在一起，堵死，打不 出溶剂，(缓冲盐流动相) 用高质量的溶剂冲洗，不同极性 溶剂冲洗,如水、甲醇、异丙醇、 二氯甲烷…，更换新单向阀。 ?2007 Waters Corporation 22 2、输液泵 b. 球和阀座密封不严，压力不稳， 气泡进入阀中，紧