生物制药技术 种子扩大培养 第五单元 种子扩大培养.doc

《生物制药技术》课模块教学设计方案 学习内容 第五单元 种子扩大培养 课时 4 教学目标 专业 能力 1.理解种子扩大培养的目的。 2.能陈述工业微生物的主要培养方法。 3.能按照操作规程，完成种子的制备。 4.能按照无菌操作的要求，完成种子的转移操作。 5.熟练使用种子扩大培养的主要仪器和设备。 6.理解影响种子质量的因素。 7.掌握种子扩大培养的一般工艺过程。 8.能按照要求，对种子质量进行判断。 9.能按照要求，对种子质量实施控制。 10.能根据实训要求，设计酵母菌的种子扩大培养流程。 方法 能力 自学能力、执行力、团队协作能力 社会 能力 培养团队协作意识。 目标群体 学生学习了《生物化学》《微生物学》等前期课程，具备了学习本课程的基础知识。 教学环境 多媒体教学 教学方法 讨论教学、分组教学 时间 安排 教学过程设计 第1-2节 第3-4节 任务一 种子的制备过程 一、种子扩大培养定义：是指将保存在冷冻干燥管、斜面试管等中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和高质量的纯种的过程。 发酵时间长短与种子量的多少有关。 二、种子扩大培养的任务和培养类型 1、任务： 获得大量的活力强的种子，以便在发酵罐的发酵培养过程中尽可能地缩短迟滞期。 扩大培养的级数：放线菌（生产抗生素）三级放大，（其中链霉素须四级扩大）；细菌生长较快，用二级放大培养（斜面菌种→一级种子摇床培养→二级种子罐培养→发酵罐） 2.培养类型 实验室种子扩大培养的方法： ①液体培养法（三角瓶摇床振荡或转式培养）； ②固体培养法：试管、三角瓶、茄子瓶 生产车间种子扩大培养的方法：A、固体培养（曲法培养） B、液体培养 液体深层培养： 目前几乎所有的好气发酵均采用此法； 任务二 影响种子质量的因素 影响种子质量的主要因素1、培养基： 选用原则：组分简单，来源丰富，价格便宜，取材方便等。种子培养基是培养菌体的（以菌体增殖为主要目的），应该是糖份少而氮源多些。 但种子罐与发酵罐培养基成分趋于一致时，可缩短发酵生产的周期，但在各成分的数量（原料配比上），应根据培养目的而定。 2、种龄与接种量 种龄：种子培养时间。 一般选择对数期，缩短发酵周期。 接种量：移入的种子液体积与接种后培养液体积比。 多数抗生素的接种量在7%-15%，有时20-25%。依据具 体的发酵类型和工艺条件而定。 3、温度： 温度直接影响生长和酶的合成；最适温度 4、pH值：对微生物有明显的影响 各种微生物都有生长的最适pH。培养基pH值在发酵时要受菌体代谢的影响。 调节方法 (1) 酸碱溶液中和 (2) 缓冲溶液 (3) 生理缓冲剂 5、通气搅拌搅拌：促进氧的溶解，营养物质与代谢产物的分散。 通气：通气量的多少以溶解氧来衡定。 6、泡沫：危害：影响微生物对氧的吸收。 消泡方法： （1） 消泡剂：天然动植物油、石油化工矿物油；改性油，表面活性剂（有机硅聚合物）； （2）机械消泡： （3）改变培养基成分。 7、染菌的控制染菌原因： 设备、管道、阀门漏损、发酵罐结构“死角”、灭菌不彻底、空气净化不好、无菌操作不严、菌种不纯；