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抗菌药物敏感性试验 Antimicrobial Sensitivity Test 安康检验：余金杰 电话邮箱：jinjie.yu@ 药敏试验的概述 第 一 章 第一节 药敏试验的定义 药敏试验简称药物敏感试验（或耐药试验）。旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感（或耐受）程度，以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。一种抗生素如果以很小的剂量便可抑制、杀灭致病菌，则称该种致病菌对该抗生素“敏感”。反之，则称为“不敏感”或“耐药”。 定义 当前，“对症下药”已经变得难以奏效。首先，致病菌的种类发生了改变，一种疾病可以由多种病原菌所引起，包括致病菌和条件致病菌；其次，感染人群发生变化，从健康人群到老年人、长期使用激素、免疫抑制剂及放疗、化疗的人群，临床症状常常不典型；最后，早期不规范使用抗生素，也会导致临床症状不典型。 对症下药 第二节 还能轻松对症下药吗？ 与此同时，“对菌下药”又难以获得满意效果。耐药菌尤其是多重耐药菌的出现，使临床医师按照抗生素的作用机制选择1～2种抗菌药物不能覆盖常见的病原菌。因此，药敏试验成为临床工作的重要手段之一。 对菌下药 第三节 药敏试验的意义 B D A C ② 指导临床医生合理选择抗生素，AST的结果为“耐药”，则应更换药物。 ④ 监测耐药性，分析耐药菌变迁，掌握耐药菌感染病流行病学，控制和预防耐药菌感染发生和流行。 ③ 提供所选择药物的依据； ① 可预测抗菌药物治疗的效果， “敏感”治疗可能有效；“耐药” 可能失败； 药敏试验常用方法 第 二 章 第一节 药敏试验常用方法 01 Kirby-Bauer法（K-B纸片琼脂扩散法）和 直接纸片药敏法 纸片扩散法 02 琼脂稀释法和肉汤稀释法。 稀释法 03 抗生素浓度梯度法-E 试 验（E-test） 抗生素浓度梯度法 为了解致病菌对哪种抗菌素敏感，以合理用药，减少盲目性，往往应进行药物敏感试验。其大致方法是：从病人的感染部位采取含致病菌的标本，接种在适当的培养基上，于一定条件下培养；同时将分别沾有一定量各种抗生素的纸片贴在培养基表面（或用不锈钢圈，内放定量抗生素溶液），培养一定时间后观察结果。由于致病菌对各种抗生素的敏感程度不同，在药物纸片周围便出现不同大小的抑制病菌生长而形成的“空圈”，称为抑菌圈。抑菌圈大小与致病菌对各种抗生素的敏感程度成正比关系。于是可以根据试验结果有针对性地选用抗生素。 YAO MIN SHI YAN DA ZHI FANG FA 第二节 药敏试验大致方法 试验原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分，溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系，即抑菌圈愈大，MIC值愈小 一、纸片扩散法 判定标准 一、药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。 表一 药敏试验判定标准 具体对于不同的菌株，及不同的抗生素纸片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。 二、药物敏感实验判定标准参考表1，多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。 试验原理 将药物混匀于琼脂培养基中，配制含不同浓度药物平板，使用多头接种器接种细菌，经孵育后观察细菌生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含药物浓度测得MIC。 MIC：稀释法所测得的某抗菌药物能抑制被检菌肉眼可见生长的最低浓度 二、稀释法 试验原理 E试条是一条 5mm×50mm的无孔试剂载体，一面固定有预先制备的，浓度呈连续指数增长稀释抗生素，另一面有读数和判别的刻度。将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上，经孵育过夜，围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈，圈的边缘与试条交点的刻度浓度即为抗生素抑制细菌的最低浓度。 三、抗生素浓度梯度法-E 试 验 结果判断和报告 读取椭圆形抑菌 圈与E试验试条 的交界点值，即 为MIC值 三种方法的比较 纸片扩散法 稀释法 E-Test 优点 缺点 操作简单，重复性好； 成本较低；无需特殊设备； 灵活选择抗菌药物； 结果容易理解 标准化方法，结果可靠； 检测菌的范