影响酶促反应速度的因素.ppt

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影响酶促反应速度的因素10高职工分一班实验孟璠

目录目的和要求1试剂和器材3操作步骤2结论4注意事项5结束6

目的和要求了解影响酶促反应速度的因素通过本实验证明温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响

温度步骤激活剂与抑制剂PH

温度对酶活力的影响?原理酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度37—40℃,植物酶的最适温度为50—60℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100℃,其活性并无明显变化,但在100℃的溶液中却容易失活。低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。

步骤试管12345备注1%淀粉(mL)1.01.01.01.01.0温度预处理(10min)37℃0℃沸水浴0℃沸水浴水浴恒温以后才加酶多酶片溶液(淀粉酶)1ml1ml1ml1ml1ml反应10min40℃0℃沸水浴冷却0℃40℃沸水浴40℃碘液(滴)11111现象

pH对酶活性的影响原理酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同本实验观察PH对淀粉酶活性的影响,淀粉酶的最适PH约为6.8

试管0.2m/lNa2HPO4(mL)0.1m/lNaH2PO4(mL)反应体系pH1%淀粉(mL)温度预处理淀粉酶(ml)反应监控现01混匀,40℃孵育2min1向各试管中加入淀粉酶的时间尽量保持一致。将各试管内容物混匀,并依次置于37oC恒温水浴中保温8113972288.011步骤步骤详解在白瓷盘中滴加1-2滴碘液,反应开始后每1-2min各管取三种溶液中两滴反应液,进行碘显色观察;记录最先显著变浅的管号和反应时间。此时将所有试管取出,加入1滴碘液,比较颜色。

激活剂和抑制剂对酶活性的影响原理酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。能使酶的活性增加的物质称为激活剂,使酶的活性降低的物质,称为抑制剂氯离子为淀粉酶的活化剂,铜离子为其抑制剂

步骤试管1234备注1%淀粉(mL)1.01.01.01.01%NaCl(mL)1---1%CuSO4(mL)-1--1%Na2SO4(mL)--1-水(mL)---1摇匀,40℃反应2分钟。(据第一次显色情况,调节观测频度)淀粉酶(mL)1111在白瓷盘中滴加1-2滴碘液,反应开始后每1-2min各管取两滴反应液,碘显色观察;记录最先显著变浅的管号和反应时间。将所有试管取出,加入1滴碘液,比较颜色。

试剂0.2mol/L磷酸氢二钠(ml)0.1mol/L柠檬酸(ml)ph20579538972288.0试剂一(ph)

试剂二试剂配方(国标)备注碘-碘化钾溶液碘4g+碘化钾6g溶于100ml蒸馏水棕色瓶保存本尼迪特(Benedict)试剂173克柠檬酸钠+100克无水碳酸钠溶于800ml蒸馏水17.3克结晶硫酸铜溶解在100毫升水中混合,过滤1%淀粉可溶性淀粉1g+蒸馏水100ml具体配置方法(跳转)多酶片一盒处理方法(跳转)1%Nacl溶液根据公式计算1%CuSO4溶液1%Na2so4溶液

器材器材试管配套装置试管、试管夹、试管架玻璃器材滴管、吸量管、大小烧杯、漏斗、滤纸标记物品标签纸显色装置白瓷板(显色板)特殊处理恒温水浴箱、研钵、小刀

淀粉糊精淀粉酶淀粉水解程度不同,遇碘呈色反应不同。因此,可以通过呈色反应,了解淀粉水解的程度,从而间接判断多酶片酶活力的大小。粉紫色糊精红色糊精无色糊精-麦芽糖淀粉水解如下:遇碘呈蓝色紫色红色碘本色碘本色注意:中间可能出现其它过渡色,如蓝紫色、棕红色等。碘本色是黄色淀粉紫色糊精红色糊精无色糊精-麦芽糖颜色变化原因

本实验结论通过实验现象可以得出影响酶促反应的因素是多种多样的。酶促反应的速度取决于酶和底物的浓度,同时也受温度、ph值、激活剂和抑制剂等因素影响1.温度各种酶在最适温度内活性最强,酶促反应速度最快,过高过低的温度都会降低酶促反应速度2.ph值每种酶都有最适ph值,大于或者小于最适ph值,都会降低酶的活性3.酶的抑制剂酶的抑制剂可降低酶促反应速度4.酶的激活剂酶的激活剂可以提高酶的活性,在一定条件下可以加速酶促反应速度

注意事项各实验

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