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实验时间:2010年11月2日
一、实验目的
1.观察哺乳动物小肠平滑肌的一般生理特性;
2.观察某些理化因素对小肠平滑肌的自律性活动和紧张性的影响;
3.学习哺乳动物离体小肠体外实验的方法。
二、实验原理
消化道平滑肌具有肌肉组织的共同特点,如兴奋(excitability)、传导性(conductibility)
和收缩性(contractibility),还表现出自身的功能特点,如兴奋性较低,收缩缓慢;自动节
律性(autorhythmicity);具有一定的紧张性(tonicity);具有较大的伸展性(extensibility);
对电刺激、切割、烧灼不敏感,但对于机械牵张、温度变化和化学刺激特别敏感。消化道平
滑肌在离体后,置于适宜的环境中仍能进行节律性收缩(rhythmiccontraction),对环境中各
种理化因素,如环境的温度、酸碱度、渗透压、一些特殊的无机盐离子、某些生物活性物质
以及供氧和牵拉等刺激敏感,这些刺激都可以改变消化道平滑肌的收缩活动,而表现为收缩
的节律、强度、速度以及紧张性收缩等方面的改变。
三、实验器材
BL生物机能实验系统,机械-电换能器,恒温水浴灌流槽,温度计,台氏液,常用手术
器械,1︰10000肾上腺素,1︰10000乙酰胆碱,1︰10000阿托品,1NNaCl,1NHCl;
大鼠。
四、实验步骤
1.标本制备:十二指肠向下取20~30cm的肠段,除去肠系膜及周围脂肪组织之后,
用台氏液冲洗干净,保存于盛有室温台氏液的培养皿中备用;
2.固定:实验取2~3cm的肠段,用棉线结扎两端肠段的对角(注意应避免封闭肠管,
保持肠管管腔能与溶液相通)。将此肠段一端通过铁勾固定在灌流槽的内槽底部(肠
段与铁勾间的间隙应比较小,以免肠管摆动),内槽中的台氏液以刚能淹没肠管为
宜。开启供氧装置供给标本氧气,以保持平滑肌的生理机能。另一端则通过棉线连
接机械-电换能器的悬梁臂上,标本与换能器连线保持垂直,且松紧度适当,不要与
灌流槽内壁接触;
3.实验装置:如图3.1。灌流槽分为内
槽和外槽。内槽为浸浴实验标本用
(槽内盛台氏液),内槽底部有一个
开口,排放液体之用。另外内槽壁
还附有一个铁勾,用于固定小肠平
滑肌,与铁勾伴行的还有一个连接
供氧装置,用于供给肠管活动所需
要的氧气。外槽的上、下两端有两
个开口,其下端开口连接恒温水浴
的出水口,上端开口连接恒温水浴
的进水口,开启恒温水浴的循环按
图3.1实验设备架设示意图
保持在~38℃;
4.离体小肠平滑肌的正常收缩曲线:观察曲线的节律、幅度。收缩曲线的基线升高,
表示小肠平滑肌的紧张性升高,反之则下降;
5.肾上腺素的作用:在内槽台氏液中加入1~2滴1︰10000肾上腺素;
6.乙酰胆碱的作用:加入1~2滴1︰10000乙酰胆碱;
7.阿托品的作用:加入1︰10000阿托品1~2滴,2分钟后再加1︰10000乙酰胆碱1~
2滴,并与步骤6进行比较;
8.氯化钙的作用:1%CaCl21~2滴;
9.环境pH值变化的影响:在内槽中加入HCl1~2滴,显效后再加入NaOH液1~
2滴;
10.温度的影响:将内槽换成25℃的台氏液,同时关闭恒温加热装置,使内槽台氏液
温度逐渐降至25℃,记录平滑肌收缩情况。同法加入45℃台氏液并记录曲线变化,
同时观察肠段紧张度。
五、实验结果
1.正常收缩曲线:
图3.2小肠平滑肌正常收缩曲线
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