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质粒介导293细胞转gfp基因系列实验;GFP（greenfluorescentprotein）;pIRES-GFP;HumanEmbryonicKidney293cells;Experiments;热激法将pIRES-GFP转化到细菌（DH5α）中
;质粒：是存在于细菌染色体以外的小型环状双链DNA，能自主复制和表达其携带的遗传信息;实验原理;;实验流程;
;
;思考题;思考题;转化细菌克隆的扩增;DH5α培养条件;质粒抽提;pIRES-GFP转染293细胞——PEI转染法;实验步骤;电击转染法;电穿孔法转染哺乳动物细胞;
;Multiporator多功能细胞电穿孔/融合仪;NucleofectionSolutions
SolutionI:
2gATP-diSodiumSalt
1.2gMgCl2-6H2O
10mlH2O
-filteredsterilize(0.22um)-80ulaliquots
Storeat-20C
SolutionII:
6gKH2PO4
0.6gNaHCO3
0.2gglucose
300mlH2O
-adjustpHto7.4withNaOH
FinalVolume500ml
Filtersterilize,4mlaliquots
Storeat-20C
Whenusing,thawatroomtemperatureandmix1aliquotsolutionIand1aliquotsolutionII.Mixturecouldbestoredat4Cforonemonthor-20forlonger.
Electroporationcuvette(2mmGap),Fisher,FB102
Transferpipette231,Extendedfinetip,Sm?Bulb,?SAMCOScientific
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